黄酮类化合物CJY对β-淀粉样蛋白25-35介导的PC12细胞损伤的保护作用及机制与研究.pdf

摘要 cell) 氧化损伤的保护作用及其可能机制。 uM)对PCI2细胞进行损伤， 方法：应用不同浓度的H202(100，300，500，700，1000 通过倒置显微镜观察细胞的形态，MTT法测定PCI2细胞的损伤率，确定出引起细胞损伤 的最佳损伤浓度和最佳损伤时间，研究黄酮类化合物和对照品维生素E对H202诱导的 uM)对PCI2 PCI2细胞损伤的保护作用。应用不同浓度的Ap25-35(1，10，20，30，50 细胞进行损伤，通过倒置显微镜观察细胞的形态，MTT法测定PCI2细胞的损伤率和存活 率，确定出引起细胞损伤的最佳损伤浓度和最佳损伤时间；采用NOS和SOD试剂盒检测 的抗氧化损伤的作用机制；采用吖啶橙(Acridine 像系统检测细胞线粒体膜电位的变化；采用钙离子敏感的荧光探针Fura一2／AM检测细胞 内游离Ca2+浓度，采用Western 合物对细胞凋亡的保护作用的可能机制。 结果：1，经终浓度为500u Il 胞的存活率，而终浓度为5IIM，10uM，50M的黄酮类化合物可明显改善损伤细胞形 u 态，显著提高PCI2细胞的存活率，并呈浓度依赖性。2，经终浓度为10M的凝聚态AB：。一拍 uM，10uM， 与PCI2细胞共同培养24小时后，可显著降低细胞的存活率，而浓度为5 50IIM的黄酮类化合物可明显改善细胞形态，显著提高PCI2细胞的存活率，并呈浓度依 赖性。3，A B：油可触发细胞内的氧化应激反应，造成细胞氧化损伤，提高细胞内ROS 水平，显著降低细胞内SOD的活性，提高NOS活性；黄酮类化合物则显著降低细胞内ROS 10II 度的黄酮类化合物预处理2小时，可明显改善损伤细胞形态，抑制Ap25．35诱导的线粒体 表达。 作用，为进一步研究黄酮类化合物在阿尔茨海默病中的应用提供实验依据。 关键词：黄酮类化合物，H202，B一淀粉样蛋白25-35，PCI2细胞 ABSTRACT thethe of Objective：Toinvestigate effectflavanoidsand its mechanism protective possible onthe 25—35-inducedinrat I beta-amyloidprotein injuries cells(PC2cells)． pheochromocytoma Methods：The towardPCI 2cellsWaSinduced cytotoxicity differentconcentrationof make by H202．We surewhatisthe besttimeandwhatisthemost concentrationof toinducecelluar approptiate H202 injuries by cell inver