双向电泳技术原理及其应用.pdfVIP

第 22 卷第 2 期 国外医学 ·生理 、病理科学与临床分册 Vol . 22 　No . 2 2002 年 4 月 Foreign Medical Sciences ·Section of Pathophysiology and Clinical Medicine 　　　　　　　　　 Apr . 　2002 ① 双向电泳技术原理及其应用 刘上峰 　傅俊江 　综述 　　李麓芸 　审校 ( 中南大学湘雅医学院人类生殖工程研究室 ,湖南 长沙 410078) 摘要 : 双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一 ,本文对其基本原理 、分辨率 、可重复性 、相关数据库 、减法 分析等作了介绍 ,并对其今后的发展方向作了展望 。 关键词 : 双向电泳 ; 　蛋白质组 ; 　数据库 ; 　减法分析 ( ) 中图分类号 : R31833 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 2002 　　随着后基因组时代的到来 ,蛋白质组学应运而 点[2 ] ,一般的2DE 能分辨 1000～3000 个蛋白质点 。 ( ) 生 。双 向电泳 twodimensional electrophoresis , 2DE 常用改善分辨率的主要措施有 :应用复杂的两 ( 作为蛋白质组研究的三大关键核心技术之一 另二 ( ) 性电解质 ,减少凝胶厚度 1. 5～0 . 5 mm 以及增大凝 种是质谱技术和计算机图像数据处理与蛋白质组数 ( ) [3 ] 胶面积 30cm ～40cm 。HumpherySmith 等 创立了 ) 据库即蛋白质组信息学 ,仍然是 目前分析组份复杂 ( ) 蛋白质组重叠群 proteomic contig 来提高分辨率 , 即 蛋白质分辨率最高的工具 , 因此 日益受到人们的广 利用多块不同p H 梯度和/ 或分子量上相互重叠的双 泛关注 。 向电泳图谱 ,拼接成一张完整的双向电泳图谱 。但 1 　双向电泳的基本原理 因细胞内含有 3 ～5 万种蛋 白质 ,远远不能满足需 首先根据蛋白质等电点不同在 p H 梯度胶中等 要 。尽管在膜蛋白制备和双向电泳 p H 梯度范围扩 ( ) [4～6 ] 电聚焦 isoelectric focusing , IEF 将其分离 ,然后按照 展 上有了较大改进 ,应用极窄p H 梯度胶分离蛋 它们的分子量大小在垂直方向或水平方向进行十二 白质组已有报道[