BDFACSCalibur流式细胞仪操作手册X.pdf

BD FACSCalibur 流式细胞仪 FACS101 Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术 应用，请至本公司网站订阅FACSinformation电子报.tw/bdb/index.html 。 如需要本课程手册，欢迎至本公司网站下载.tw/bdb/10-5-3-1.html 。 如需要免疫荧光染色方法，请至本公司网站下载.tw/bdb/10-5-4-1.html 。 一、BD FACSCalibur 基本结构 1.1 仪器本体： 1. 电源开关：在BD FACSCalibur仪器右侧下方，先启动仪器本体，再打开计算机。 2. 光学系统：BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射 以BD FACSCalibur 基本型为例  FSC Diode 只收488 nm波长散射光  SSC PMT 只收488 nm波长散射光  FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围（波长515-545 nm ）  FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围（波长564-606 nm ）  FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围（波长650 nm ） FACS101 Handbook - 1 – 3. 仪器面板： 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制： LO： 样品流速：12 µl /min MED：样品流速：35 µl /min HI: 样品流速：60 µl /min 功能控制： • RUN：此时上样管加压，使细胞悬液从进样针进入流动室。（正常显示绿 色；黄色时表示仪器不正常，请检查是否失压。） • STANDBY：无样品或暖机时之正常位置，此时鞘液停止流动，雷射功率 自动降低。 • PRIME：去除流动室中的气泡，流动室施以反向压力，将液流从流动室冲 入样品管，持续一定时间后，以鞘液回注满流动室。PRIME 结束，仪器 恢复STANDBY 状态。 4. 储液箱抽屉： 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开，内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤 器Sheath Filter，及空气滤网Air filter 。请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位 置。 FACS101 Handbook - 2 – • 鞘液筒：位于抽屉左侧，容积4 升。装八分满鞘液筒，仪器可以运行大约3 小时。筒上装有液面感应器，鞘液用完时，仪器软件上会有显示。鞘液筒盖 上有金属环扣，保证鞘液筒密闭。 • 废液筒：位于抽屉右侧，容积4 升。筒上装有液面感应器，废液盛满时，仪 器软件上会有显示。注意废液可能有潜在的生物传染性。 • 鞘液过滤器：0.22µm 过滤器，去除鞘液中的杂质，保证进入流动室的鞘液 是干净的。 • 气路减压阀：沿箭头方向移动阀门开关，鞘液筒减压，气压恢复正常。在鞘 液筒添加鞘液时，需要减压。 • 空气过滤网：用于过滤冷却雷射的空气。 5. 上样品区： 上样品区是样本管的上样位置。它包括三个部 分，一个是进样针Sample Injection Tube，将 样本输入流动室，还有就是支撑架Tube Support Arm、