口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备及其对应表位区分析.pdfVIP

第33卷第9期 中国预防兽医学报 V01．33．NO．9 2011年9月 Chme∞JournalofPreventive Medicine Sep．201l Veterinary 1．09．15 doi：10．3969巧．issn．1008—0589．201 口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备 及其对应表位区分析 刘丹丹1，高明春1，宋军1，宋 鸽1，曹永生，，张润祥·，李 爽z，于 力：，王君伟-+ (1．东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030； 2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150001) 3AB 摘要：为鉴定口蹄疫病毒(FMDV)fi白非结构蛋白3AB的抗原表位，本研究以原核表达并纯化的FMDV 重组蛋白免疫BALB／c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，通过间接ELISA进行筛选，获得6株能 K链。间接免疫荧光试验结果表明，这6株MAbs均能够识别FMDV3AB蛋白。采用制备的MAb对分段表达的 55～aa 64～aa 3AB蛋白进行westernblot分析，结合位点分别位于3AB的第aa70、aa 79、aa130～aa145区段。 该结果为进一步探索3AB蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。 关键词：口蹄疫病毒；非结构蛋白3AB；单克隆抗体；抗原表位区 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号：1008．0589(2011)09—0733—05 ofmonoclonalantibodies Preparation nonstructural against n3ABoffoot--and--mouthdiseasevirusand of protei analysis their domains epitope antigenic LIU Dan-danl，GAOMing·chunl，SONGJunl，SONGGel，CAO Yong-shen91，ZHANGRun—xian91， LI Jun．weil+ Shuan乎，YULi2，WANG (1．CollegeofVeterinaryMedicine，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；2．State KeyLaboratoryofVeterinary Research of Bioteclmology，HarbinVeterinaryInstitute，ChineseAcademyAgriculturalScience