口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAb ELISA方法的初步建立.pdfVIP

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2015-09-29 发布于湖北
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口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAb ELISA方法的初步建立.pdf

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口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAb ELISA方法的初步建立.pdf

第36卷第6期中国预防兽医学报 V01．36．No．6 2014年6月 ChineseJoumalofPreventive Medicine Jun． 2014 Veterinary doi：10．3969／j．issn．1008-0589．2014．06．08 MAbELISA方法的初步建立李超斯1一一，周国辉2，孙静1一，刘云卜，于力z+ (1．东北农业大学动物医学院，黑龙江哈尔滨150030； 2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／牛羊传染病研究创新团队，黑龙江哈尔滨150001) 摘要：为建立区分口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫和自然感染动物的血清学鉴别检测方法，本研究采用杆状非结构蛋白3B作为抗原筛选融合细胞的培养上清液，获得一株稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细交瘤细胞上清液和腹水的抗体效价分别为1：12 800和l：106。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1．5mol／L。采用该MAb作为包被抗体并特异性的结合原核表达的3B重组蛋白用于检测血清中抗FMDv的非结构蛋白抗体，清l：100稀释，通过检测猪血清并与3B间接ELIsA和priocHEcK@NsPELIsA试剂盒进行比较，表明该方法具有更强的特异性。关键词：口蹄疫病毒；3B重组蛋白；MAb；ELIsA 中图分类号：S852．65 文献标识码：A OfmOnOCIOnal PreparatiOn antibOdyagainSt diSeaSeViruSnOnStrUCturaIand Of 3B eStablIShment prOtein MAb-basedELISA LI Li2’ Chao-sil”，ZHOUGuo—hui2，SUN Yun卜，YU Jin91…，LIU of 1 (1．CollegeVeterinaryMedicine，NonheastUniVersity，Harbin50030，China； Agricultllml 2．DiVisionLiVestock of of InfectiOns Disease，StateKeyLaboratoryVeterinaryBiotechn0109y， Harbin Research of Veterinary Institute，Chinese Sciences，Harbin15000l，China) AcademyA鲥cultural Abstract：Toestablishadetectionmethodoffoot．and-mouthdisease 3B fordi腩rentialdiagnosis