L精氨酸生物合成的代谢流量分析.pdf

维普资讯 微 生物学通报 MAR2O，2008，35(3)：395~401 M icrobiology @ 2008byInstituteofMicrobiology．CAS tongbao@im．ac．cn L．精氨酸生物合成的代谢流量分析 朱进伟 陈青山 张伟国 (江南大学_[业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122) 摘 要：建立并完善了谷氨酸棒杆菌GWY020及其 2个逐步叠加不同遗传标记的突变株HUI821 和 GU1089合成 L．精氨酸的中心代谢网络。分别测定了它们在特定培养时段(50h～52h)L一精氨酸 等代谢物的胞外浓度，由此计算这一时段这些代谢物在发酵液中积累(或消耗)的速率，分别作出 这 3株菌在拟稳态下的代谢流量分布图，进而研究育种过程 中不同遗传标记的叠加对代谢网络中 L一精氨酸合成流量分布的影响。结果表明遗传标记的引入使流量分配发生了重大变化，节点处的 流量分配朝着有利于L一精氨酸合成的方向改变。从代谢流量分析角度上，证明结构类似物抗性和 敏感性突变是代谢流导向和设计育种的有效手段，代谢流量分析将成为设计育种的提供新思路。 关键词：L一精氨酸，谷氨酸棒杆菌，代谢流量分析 M etabolicFluxAnalysisofL-ArginineFermentation inCorynebacterium glutamicum ZHUJin—Wei CHENQing．Shan ZHANGWei．Guo (TheKeyLaboratoryoflndustrialBiotechnology，MinistryofEducation，JiangnanUniversity，Wuxi214122) Abstract：InthisPaper，metabolicnetworksoftheCorynebacterium glutamicum GWY020andthetwode— rivativescarryingadditionalmutationsHUI821nadGU1089wereestablishednadmodifled．Theconcentra． tionsofextra．cellularmetabolitesweredeterminedundersub—steady，state(50h-52h1ofthebatchculture． Themetabolicfluxdistributionmapsofthethreesrtainswereobtained．comparednadanalyzed．Thesere— suitsindicatethatthe introductionofanalog supersensitivemrakerornaalog resisatntmrakerskew the metabolicfluxtowradshtefomr ationofL—Arginine．Thissutdyrevealedtheusefulnessofhtemetabolicflux analysisasatoolforverificationofexistingproductionstrains．Thenaalysismayplayanimportantrolein helpingUStorationallyre—designmetabolism forfurtherimprovementoffemr entationprocess． Keywords：L—Arginine，Corynebacterium glutamicum．M etabolicfluxna alysis L一精氨酸是合成蛋白质和肌酸的重要原料，是 法生产L一精氨酸。日本在这方面的研究处于领先水 人和动物体内的半必需氨基酸。由于L一精氨酸具有 平，他们对