新型纳米复合材料作为非病毒基因载体的研究.pdfVIP

华南理工大学学报(自然科学版) JournalofSouthChina of V01．38No．5 第38卷第5期 UniversityTechnology Science 2010 2010年5月 (Natural Edition) May 新型纳米复合材料作为非病毒基因载体的研究木 王小英1 刘博1 林鹿1 吴军2 孙润仓1 摘要：为了制备理想的非病毒基因载体，合成了甲壳三糖-g-壳聚糖(TCS)，并与钙基累 托石(REC)插层复合制备纳米复合材料，采用X射线衍射和透射电镜方法对产物进行了 表征，考察了其细胞相容性，将REC、TCS和纳米复合材料分别与质粒DNA复合形成复合 物，并考察了其体外基因转染效果．结果表明：TCS、REC及纳米复合材料的细胞相容性良 好，当N／P比为3时，TCS／DNA复合物粒径大小都在75nm左右，REC加入后，其粒径不 同程度地增大，最大达到191nm；相对分子质量高的TCS所得DNA复合物较相对分子质 量低的TCS所得DNA复合物稳定，而REC的加入降低了TCS／DNA复合物的稳定性； TCS／REC—DNA复合物能介入肝癌细胞中并表达荧光．说明该纳米复合材料可作为潜在 的非病毒基因载体． 关键词：甲壳三糖-g-壳聚糖；累托石；插层；纳米复合材料；基因转染 中图分类号：Q523；0636．9 基因治疗正逐步用于多种疾病的防治，前景十 非病毒基因载体”J． 分广阔．基因治疗的关键之一是开发安全有效的基 聚合物／层状硅酸盐纳米复合材料由于二者的 因载体，当前基因载体分为病毒类载体和非病毒类 耦合作用而具有许多优异的性能怕J．由此本研究耦 载体．病毒载体对大多数靶细胞具有高效的转染率， 合TCS与REC的基因转染优势，利用水溶液插层 但有制备复杂、有免疫原性、存在安全隐患等不足． 法，制备新型的TCS／REC纳米复合材料作为非病毒 非病毒载体则能克服这些缺点，因而成为当今研究 基因载体，考察了该纳米复合材料的细胞相容性，分 的热点．迄今为止，研究最广泛的非病毒基因载体为 J． 性，重点研究相对分子质量的影响，并初步考察其基 接枝化聚乙烯亚胺，但其还是具有一定的毒性【l 从虾蟹壳中提取的天然高分子壳聚糖生物相容 因转染效率． 性和生物降解性好，基本无细胞毒性，是极具潜力的 1 实验部分 非病毒载体怛J．甲壳三糖．g．壳聚糖(TCS)是壳聚糖 水溶性衍生物，由于甲壳三糖的细胞核靶向性和在 1．1 试剂 缓冲液中的稳定性，该接枝化壳聚糖获得了较高的 盐酸化壳聚糖由挪威科技大学提供，相对分子质 体内和体外基因转染效率…．此外，粘土如蒙脱土， 伊利石及高岭土具有较好的保护DNA不被降解的 脱乙酰反应得到．REC由湖北名流REC科技股份有 能力[3-4]，钙基累托石(REC)是近几年研究较多的 一种粘土，笔者前期工作表明REC也可作为有效的 生物医学结构中心提供．其它试剂均为分析纯． 收稿日期：2009．06．09 资源可持续利用重点实验室、广东省应用生物学重点实验室和海洋药物重点实验室联合开放基金资助项目(I朋B081002) 作者简介：王小英(1978-)，女，博士，讲师，主要从事再生资源化学生物学研究．E-mail：xyw@seut．edu．cn 万方数据 华南理工大学学报(自然科学版) 第38卷