AmrB 对嗜水气单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药性的影响.pdf

中国农业科技导报,2013,15(3):123-128 Journal of Agricultural Science and Technology AmrB对嗜水气单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药性的影响 1 2 1 1 1 1 张丹凤 ,　 陈国平 ,　 张国广 ,　 黄家福 ,　 华秀婷 ,　 陈　 阳 (1.漳州师范学院生物科学与技术系,福建 漳州363000;2.漳州市农业局种植业管理站,福建 漳州363000) 摘　 要:AmrB是药物外排系统的重要成员,探讨AmrB与嗜水气单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药性的关系,对 研究嗜水气单胞菌耐药机制有重要意义。 将amrB基因克隆至pET-28a载体上,双酶切和测序验证得到重组 质粒amrB-pET-28a。 对amrB-pET-28a/ BL21进行诱导表达和镍柱纯化,制备得到效价为1∶6400 的兔抗AmrB 抗血清。 诱导获得嗜水气单胞菌AH1卡那霉素、链霉素和庆大霉素耐药菌株,Western blotting分析AmrB在 耐药菌株中的表达量。 Phoretix 1D和SPSS分析表明,AmrB的表达量在卡那霉素、链霉素和庆大霉素耐药菌 株中显著地高于对照菌嗜水气单胞菌AH1,分别是对照的2.16、2.65和2.13倍,提示AmrB在嗜水气单胞菌 对氨基糖苷类抗生素耐药过程中起重要作用,这将有助于了解嗜水气单胞菌耐药的分子机制。 关键词:嗜水气单胞菌;AmrB;耐药;氨基糖苷类抗生素 doi:10.3969/ j.issn.1008-0864.2013.03.17 中图分类号:Q816　 　 　 文献标识码:A　 　 　 文章编号:1008-0864(2013)03-0123-06 The Effect of AmrB onAeromonas hydrophila Aminoglycosides Resistance 1 2 1 1 ZHANG Dan-feng ,CHEN Guo-ping ,ZHANG Guo-guang ,HUANGJia-fu , 1 1 HUA Xiu-ting ,CHEN Yang (1.Department of Biological Sciences and Biotechnology,Zhangzhou Normal University,Fujian Zhangzhou,363000; 2.Planting Management Station,Zhangzhou Agriculture Bureau,Fujian Zhangzhou363000,China) Abstract:AmrB is a crucial member of drug efflux pump. Investigating the relationship between AmrB and the aminoglycosides resistance ofAeromonas hydrophila is supposed to be important for understanding the mechanism of its drugresistance. amrB genewasclonedtopET-28avectorandconfirmedby doubledigestionandsequencing,thus obtained amrB-pET-28a. amrB-pET-28a/ BL21 was induced by IPTG