DOPC,DOPE和神经酰胺对鞘磷脂胆固醇双层膜结构的影响.pdf

V01．30 高等学校化学学报 No．5 CHEMICAL OFCHINESEUNIVERSmES 913～918 2009年5月 JOURNAL DOPC，DOPE和神经酰胺对鞘磷脂／ 胆固醇双层膜结构的影响 郝长春1，孙润广1，张静2 (1．陕西师范大学物理学与信息技术学院生物物理与生物医学工程研究室， 2．食品工程与营养科学学院，西安710062) 表面压力较低时，每种混合脂双层膜都呈现均匀分布的脂双层结构．随着表面压力的增加，形态发生了明显 的变化：(1)SM／Chol二元组分双层膜形成均一的液态有序相微区结构，衬底覆盖率达到80％；(2)DOPC 的加入促使SM／Chol双层膜出现相分离现象，SM／Chol形成的液态有序相“岛状”微区结构漂浮在液态无序 排，两层脂分子间发生翻转形成囊泡结构，部分神经酰胺从液态有序相中分离形成小颗粒结构．在较高膜压 下，各系统都旱现出具有特定形态的双层膜结构．分子官能团的成键能力决定了双层膜形态结构． 关键词脂筏；LB膜技术；原子力显微镜；相分离 中图分类号0621；0641文献标识码A 文章编号0251-0790(2009)05-0913-06 生物膜是含有多种脂质、糖类和膜蛋白的超分子聚集体，其结构与功能的关系一直是很多科学家 rafts)是近年来发现的介于液晶相与凝胶相之间的动态微区结构，它游动于 感兴趣的问题．脂筏(Lipid 磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)为骨架的液晶态双层膜中，是生物膜不被去垢剂所溶解的部分， 又称Detergent—insolubleglycolipid—richeddomains(DIGs)，或Detergent—resistant 含有大量的信号分子，在细胞信号转导、蛋白质分选、离子通道的调节及膜的粘连等生物学过程中起 着重要的作用，同时还与多种疾病，如肿瘤、糖尿病和神经退行性疾病(如老年痴呆症、帕金森氏症 等)的发生有关联口J．脂筏结构分离目前主要是通过去垢剂将细胞膜破裂，提取有效成分进行分析研 究．但在此过程中去垢剂的引入对于脂筏微区结构的形态、尺寸及稳定性研究带来一定困难MJ．体外 模拟是理解生物膜脂筏微区结构形成的有效途径，脂与脂间的相互作用是脂筏微区结构形成的基础． 由脂与脂相互作用形成的单层膜或双层膜出现了不溶于非离子去垢剂的微区结构【5J．LB技术是制备 单层膜和双层膜的一种比较有效的方法，通过改变单分子膜表面压力和亚相成分，可以在接近生理状 态下模拟生物膜的状态和作用机制∞J． 鞘脂、胆固醇和甘油磷脂组成的系统常被用来研究脂筏微区结构的形成，在细胞膜中这些微区对 于细胞信号的传导起着重要的作用．DOPC和DOPE是生物膜中含量最丰富的甘油磷脂脂，神经酰胺 是构成脂筏的重要分子之一，是与生物膜相连的第二信使分子，参与细胞的分化和凋亡过程]．本文 LB双层膜结构的影 响．实验结果表明，每一组双层膜都呈现出独特的结构特征．双层膜微区结构主要是由分子间的氢键 相互作用、静电相互作用、范德华相互作用引起，这些相的出现可能与细胞膜中许多生理学过程有关． 收稿日期：2008—10-28． 基金(批准号：2008CXB012)资助． 万方数据万方数据 914 高等学校化学学报 V01．30 1实验部分 1．1试剂与仪器 芬兰KSV公司)． 1．2 LB双层膜的制备 用氯仿对聚四氟乙烯槽进行清洗，再用二次蒸馏水冲洗．将不同的脂溶解在氯仿／甲醇(体积比为 3：1)中，形成浓度为0．5mg／mL的溶液．用微量进样器将适量的溶液均匀地滴加到纯水亚相表面，让 其自动迅速铺展．静置15min，待亚相上有机溶剂完全挥发后，以10mm／min的速度压膜．膜表面压 mN／m．在固定的膜压下