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E. coli 谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究
核 农 学 报 2009 ,23 (5) :789～793 789
J ournal of N uclear Agricultural Sciences
( )
文章编号 2009 0578905
E . coli 谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究
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左 斌 刘唐兴 丰 来 谭显胜 孟桂元
( 1. 湖南农业大学生物科技学院 ,湖南 长沙 410128 ; 2 . 湖南生物机电职业技术学院 ,湖南 长沙 410127 ;
3 . 湖南农业大学生物安全科学技术学院 ,湖南 长沙 410128 ; 4 . 湖南农业大学农学院 ,湖南 长沙 410128)
( ) ( )
摘 要 : 以普通大肠杆菌 E . coli 为出发菌株 , 以L谷氨酸 、溴甲酚绿 p H38～54 为筛选及指示剂 ,经
( ) ( )
亚硝基胍 NTG 、UV 诱变处理 ,得到L谷氨酸脱羧酶活性变异菌株 ,其L谷氨酸脱羧酶 GAD 活性大幅
度提高 , 比出发菌株酶活性提高了222 倍 。优化试验显示 :p H 值 、发酵时间、诱导剂 L谷氨酸 、硫酸镁
对 GAD 产酶有较大影响 。通过对产酶发酵培养基中几种成分单因素变动及正交优化实验 ,对该菌株产
GAD 的诱导剂L谷氨酸 、营养要求和发酵条件进行了研究 ,优化后的发酵培养基组成为牛肉膏 5 gL ,蛋
白胨 10 gL ,氯化钠 3 gL ,L谷氨酸 05 gL ,葡萄糖 15 gL ,磷酸二氢钾 2 gL ,硫酸镁 07 gL 。发酵条
件是 :p H68 ,接种菌龄 20 h ,发酵时间20 h 。在优化条件下突变菌株 GAD 活性可达 67907 U ,是出发菌
株的276 倍 。
关键词 : ( )
大肠杆菌 ;谷氨酸脱羧酶 GAD ;溴甲酚绿 ;高产突变株 ;发酵条件
BREEDING OF HIGH GAD PRODUCING E. coli STRAINS AND OPTIMIZATION OF FERMENTATION CONDITIONS
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ZUO Bin L IU Tangxing FEN G Lai TAN Xiansheng MEN G Guiyuan
( 1 College of B ioScience and Technology
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