机体保护肽固相合成、分离纯化与制备研究.pdf

机体保护肽的固相合成、分离纯化及制备研究 摘 要 本文采用Fmoc圃相合成技术首次合成了机体保护肽。从树脂的活化、氨基 酸的偶连率、脱保护试剂及切割试剂等方面研究了机体保护肽的合成工艺，使用 半制备规格反相高效液相色谱进行了纯化，并用MALDI．TOFmass飞行质谱仪对 合成产物进行了分析，建立了完整的实验室和半制备规模的机体保护肽合成一纯 化工艺路线。在优化的半制备规模的机体保护肽合成一纯化工艺路线中，与理论 产量相比，纯度为99％的机体保护肽纯品的最终收率为36．5％。 论文包括以下四个部分： 1．文献综述：简述了多肽固相合成技术，并对主要的多肽分离纯化与鉴定技术 进行了介绍，最后概述了生物活性肽类药物的应用情况与研究展望。 chloride树脂两种树脂 2．采用Fmoc固相合成法，使用Wang树脂与2一Chlorotrityl 合成机体保护肽，比较了两种树脂的合成效果。通过对树脂的活化、氨基酸的偶 连率、脱保护试剂及切割试剂等合成条件的研究优化了合成工艺，并对机体保护 肽的合成规模进行了放大。合成的多肽经过MALDI．TOFnlass鉴定表明正确无 误。 3．使用反相高效液相色谱对两种树脂合成的机体保护肽粗品进行了分析，比较 了分析结果。之后对合成粗品进行了分离纯化，优化了分离纯化条件，最后进行 了半制备规模的纯化，并使用反相液相色谱及MALDI．TOFmass对纯化产品进行 了纯度检测。 4．总结了实验的结果与意义，对今后的实验工作进行了展望。 关键词：固相合成，机体保护肽，反相高效液相色谱，MADI．TOFmass，制备 StudiesonSolid—Phase and Synthesis，Purification of Assistant PreparationOrganic Peptide Abstract Inthis Assistant atfirsttime thesis，OrganicPeptide(OAP)weresynthesized by method．The undervarious conditionsas Fmoc—solid—phase performance experimental connection and wasstudied．The was rate，DeblockCleavage synthesizedpeptide and RP—HPLC．Identificationwas separatedpurifiedbysemi—preparating performed MADI-TOFmass．Themethodof and ofOAPwas by synthesispurification established the of 99％Canbe finally．Underoptimizedconditions，OAP puffty in obtainedthe of totheoreticalvalue． yield36．5％compared Tllethesisincludesthe four foll