甲型副伤寒沙门氏菌外膜蛋白表达及免疫保护性研究.pdfVIP

摘要 摘要 伤寒是一种急性全身性感染，每年全球伤寒(包括副伤寒)患者约2200万， 死亡超过20万人。伤寒包括伤寒沙门氏菌(Salmonella typlfi)引起的伤寒和甲、 and A，B C)引起的副伤寒．近 乙、丙型副伤寒沙门氏菌(Salmonellaparatyphi 年来我国甲型副伤寒的发病率呈逐年上升趋势，研究出安全、高效、经济的疫 苗，对于预防甲型副伤寒爆发具有重大的经济社会效益． 甲型副伤寒沙门氏菌是无荚膜的革兰氏阴性菌．其外膜蛋白在致病和刺激 机体免疫应答方面起着非常重要的作用。因此，在研究和开发疫苗中，病原体 的外膜蛋白成为热点． 本论文对甲型副伤寒沙门氏菌外膜蛋白的克隆表达及其免疫保护性进行了 研究。目的在于探索应用甲型副伤寒沙门氏菌外膜蛋白作为保护性抗原，获得 甲型副伤寒候选疫苗的可能性． 本课题选择毒力较强的甲型副伤寒沙门氏菌50973做为实验菌株，以 段克隆到pET-32a表达载体，筛选出阳性克隆，用IPTG作为诱导剂，实现了这 11种目标外膜蛋白的过量表达。利用这些过表达目标蛋白在盐溶液中形成沉淀 而在水中可溶的特性实现了目标蛋白的有效分离。采用腹腔注射和体内攻毒的 方法对纯化好的外膜蛋白的免疫保护性进行了研究，结果表明，PagC、OmpX、 分别为100％、100％、95％、75％、75％和70％。 关键词：甲型副伤寒沙门氏菌；外膜蛋白；克隆：过量表达；体内攻毒；免疫 保护性 ABSll认(玎 Abstract isallacute to22 caseS systemic millionofinfection Typhoid infection．1eading motethan deaths (includingParatyphoid)and200，000 resulted annually．Typhoid fromSalmonella and fromSalmonella serotypeTyphiParatyphoid serotypes andC．Inlast theincidence a A，B Paratyphi dec．ade ofparatyphoidpresented in ofincrease andlow-cost tendency China．Therefore，asafe，effective，convenient iswarrantedfor vaccine the preventionofparatyphoidA． Salmonella Awasa bacilli、^rithout serotypesparatyphigroupofGram-negative outermembrane all rolein capsule,whose