降钙素对大鼠膝关节骨性关节炎潜在保护作用及机制.pdf

中文摘要 降钙素对大鼠膝关节骨关节炎潜在保护作用及其机制 摘 要 第一部分：降钙素对前交叉韧带切断大鼠膝关节软骨退变的影响 cruciate 断(anterior ligament 节骨关节炎(osteoarthritis，OA)模型中的关节软骨退变的影响。 机分为三组，每组10只动物，即：假手术组(Sham)、前交叉韧带切断 +盐水(normal 5 术，术后ACLT+CT组中大鼠给予CT IU／kg／2d皮下注射，ACI肿-NS 组中大鼠给予等容量NS皮下注射，Sham组中大鼠只做膝关节腔打开而 不行前交叉韧带切断，术后给予等容量NS皮下注射。造模术后12周处 死各组动物，打开右膝关节腔后，观察各组大鼠膝关节软骨面并拍照记 录。去除右侧股骨软组织后，用70％酒精固定大鼠股骨样本，固定72 小时后采用EDTA．2Na制成脱钙液进行脱钙处理，约6周后待钙盐彻底 脱失骨组织变软，然后行常规梯度酒精脱水、二甲苯透明后进行石蜡包 埋切片，将厚度约为6-8#m的骨组织石蜡切片分别行番红．O／快绿 (safranin．O／fast 用于关节软骨组织形态学观察，同时采用Mankin评分方法定量分析关 节软骨损伤情况；采用免疫组化方法检测各组大鼠膝关节软骨中II型胶 II and disintegrin 原(typecollagen)、蛋白多糖分解酶-4(a domainwith metalloproteinasethrombospondin 质金属蛋白酶．3(matrix Image 6．0软件对免疫组化阳性蛋白表达情况进行积分光密度 pro．Plus (integrated optical 阳性细胞表达差异。 结果： 中文摘要 1．大鼠膝关节软骨表面大体观察发现：Sham组大鼠膝关节软骨面光 骨面晦涩，可见关节面明显破溃，关节周围可见较大骨赘形成；而给予 CT干预大鼠膝关节软骨面显粗糙，偶见小破溃，关节周围亦有较小骨赘 形成。 2．关节软骨safranin．O／fast 大鼠关节软骨面完整，软骨与软骨下骨界限清晰，基质着色均匀一致，细 胞排列有序；ACLT+NS组术后12周大鼠关节软骨关节面严重破坏，．软 骨与软骨下骨界限模糊不清，基质着色不均，细胞呈团簇状克隆增殖，且 分布不均，软骨细胞数目明显减少；ACLT+CT组大鼠软骨表面可见小裂 隙存在，软骨与软骨下骨界限较为清楚，基质着色较为均一但着色略显变 浅，细胞排列亦稍显紊乱。 Mankin评分则明显高于Sham组，差异具有统计学意义(PO．05)。 表达则明显低于ACLT+NS组，差异具有统计学意义(PO．05)。 小结：在ACLT诱导不稳定膝关节OA大鼠动物模型中，早期应用 MMP．3表达，减轻由膝关节不稳定造成的OA大鼠膝关节软骨损伤。 第二部分：降钙素对前交叉韧带切断大鼠膝关节软骨下骨作用 谢疾病的预防与治疗中。本实验在大鼠膝关节前交叉韧带切断(anterior cruciate ligament 干预，观察CT对大鼠膝关节软骨下骨BMD及骨组织形态结构的影响。 中文摘要 动物，分别为：假手术组(Sham)，即只做大鼠右膝关节腔切开而不对前 交叉韧带进行切断术；前交叉韧带切断+盐水(normalsaline，NS)组 开并切断前交叉韧带，从而造成大鼠膝关节的不稳定状态。造模术后的 5 ACLT+CT组大鼠即给予CT 组大鼠给予等容量NS皮下注射。12周后应用过量水合氯醛腹腔注射处死 各组动物，处死前10天和前4天对所有动物依据体重分别给与四环素 软组织后，应用双能骨密度测量仪分别测量大鼠膝关节股骨软