混合短链 PEG 硫醇自组装膜制备与蛋白质固定.pdf

第４２卷 第３期 化　学　工　程 Ｖｏｌ．４２ Ｎｏ．３ ２０１４年３月 　　　　　　　　　　　　 ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ（ＣＨＩＮＡ）　　　　　　　　　　　　 Ｍａｒ．２０１４ 混合短链 ＰＥＧ硫醇自组装膜制备与蛋白质固定 刘玉婷 ，颜　莉 ，孙立民 ，李慧琴 ，李海华１ １ ２ ２ ３ （１．陕西科技大学 教育部轻化工助剂化学与技术重点实验室，陕西 西安　７１００２１；２．上海交通大学 分析测试中心， 上海　２００２４０；３．上海交通大学 微纳科学技术研究院微米／纳米技术国家重点实验室，上海　２００２４０） 摘要：采用自组装技术制备了一系列在金表面不同摩尔比的ＰＥＧ硫醇混合自组装膜，并将蛋白质共价固定在膜表 面。通过ＡＦＭ、接触角测试仪和ＸＰＳ技术对混合自组装膜和蛋白质接枝反应后表面的物理和化学性质进行了分析 表征。通过抗原抗体反应实验检验了蛋白质膜表面生物活性的相对大小。结果表明：自组装膜表面的比例组成与 溶液中的组成并不完全一致。接枝后蛋白质的形貌及蛋白质膜表面粘附力分布与自组装膜的表面组分有关并会 影响其与抗体的反应活性。当反应溶液中ＳＨＰＥＧＯＣＨ ／ＳＨＰＥＧＣＯＯＨ摩尔比为１ ∶６ 时，所形成的自组装膜的３ 表面羧基含量最大，同时粘附力也达到最高值，蛋白质活性也最大。 关键词：聚乙二醇；自组装膜；蛋白质；表面分析 中图分类号：Ｏ６５６．９　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００５９９５４（２０１４）０３００６９０６ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５９９５４．２０１４．０３．０１４ Ｍｉｘｅｄ ｓｈｏｒｔｃｈａｉｎ ＰＥＧ ｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆｐｒｏｔｅｉｎ ＬＩＵ Ｙｕｔｉｎｇ ，ＹＡＮ Ｌｉ ，ＳＵＮ Ｌｉｍｉｎ ，ＬＩ Ｈｕｉｑｉｎ ，ＬＩ Ｈａｉｈｕａ１ １ ２ ２ ３ （１．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＡｕｘｉｌｉａｒｙ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｆｏｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｏｆｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ， Ｓｈａａｎｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅ ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉ′ａｎ７１００２１，Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉａｏ Ｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２４０，Ｃｈｉｎａ；３．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂ ｏｆＮａｎｏ／Ｍｉｃｒｏ Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉａｏ Ｔｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００２４０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｍｉｘｅｄ ＰＥＧ ｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒ （ＳＡＭ）ｏｎ ｇｏｌｄ ｓｕｒｆａｃｅ ｗａｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｖａｒｙｉｎｇ ｔｈｅ ｒａｔｉｏｓ ｏｆＳＨＰＥＧＯＣＨ／ＳＨＰＥＧＣＯＯＨｉｎｔｈｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓｗｅｒｅ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ３ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ ｂｙ ｃｏｖａｌｅｎｔ ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ ｗｅｒｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ ＡＦＭ，ｃｏｎｔａｃｔ ａｎｇｌｅ ａｎｄ ＸＰＳ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｉｌｍ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｇｅｎａｎｔｉｂｏｄｙ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆＰＥＧｍｉｘｅｄ ｍｏｎｏｌａｙｅｒｉｓｄ