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技术服务领航提供商 核酸适配体技术研究 内容简介 0ne 核酸适配体的简单介绍 two SELEX技术的简单介绍 three 核酸适配体的应用 four 核酸适配体前景展望 核酸适配体 （Apatmer ）简介 适配体是指利用指数富集的配体进化技术(SELEX)从特定的寡 核苷酸库中筛选出能与靶分子特异性结合寡核苷酸(DNA或 RNA)。 适配体在分析化学,在蛋白质组研究、临床医学、药物研发及基 因调控等领域已经成为重要的研究工具。 核酸适配体简介 nucleic acid oligonucleotides aptamers 适配体的类型： ★反义核苷酸链 ★随机核苷酸链 一：反义核苷酸链 通常包含15-20个核苷酸,其碱基组成与它们的靶序列是互补的。但 是在实际应用中, 存在反义寡核苷酸容易被核酸酶降解、对特定靶 位点的识别不够好、有一定毒性等问题,所以要对适配体中的核苷 酸进行了各种各样的化学修饰。修饰位点一般在碱基、磷酸骨架等。 二：随机核苷酸链 是在反义核苷酸链的作用基础上发展来的。随机核苷酸链作用的 靶序列除了核酸外还可以是蛋白质、有机小分子等。随机核苷酸 链一般比反义核苷酸链要长,而且它们折叠形成的空间结构也往往 发挥作用。 适配体的特点 适配体具有与抗体相似的性质,并且有优于抗体的特点: (1)特异性更强，对目标靶分子具有与抗体相当甚至更高的亲和性 (2)适配体较抗体更容易获得,可以大量快速的在体外合成,制备方法 更为简单; (3)可以针对不同种类的目标靶进行筛选,拓宽了其应用范围; (4)稳定性优于抗体,利于储存。 核酸适体与配体结合特点 SELEX技术简介  SELEX是指数富集配体系统进化的简称.它的基本原理就是就是利用 分子生物学技术，构建人工合成的单链随机寡核苷酸文库，其随机 序列长度在20～100个碱基左右．将随机寡核苷酸文库与靶分子相互 作用，保留结合的寡核苷酸配基(aptamer) ，经反复扩增、筛选数个 循环，即可使与该靶分子特异结合的寡核苷酸序列得到富集。  其筛选流程包含和达尔文进化理论一样的三个过程分别是自发突变 ﹑自然选择和大量增殖. SELEX技术筛选流程 自发突变 自然选择 大量增殖 利用分子生物学技术 寡核苷酸序列形成可 通过PCR或RT-PCR 人工合成一个含 与配体特异性共价结 等技术进行扩增， 14 15 10 ～10 个单链 合的二级结构，配体 生成次一级文库， 寡核苷酸序列的随机 如氨基酸、多肽、甚 次一级文库在与配 文库，序列长度一般 至金属离子都可以同 体结合反复多次循 为25～35个核苷酸 随机文库相互作用 环。 SELEX技术原理 SELEX技术流程 核酸适配体的应用 随着筛选技术研究的发展,越来越多靶分子获得高亲和力的、高特 异性的适配体,并广泛应用于多个研究领域,特别是分子识别检测领 域。与成熟的抗体实验相比,目前适配体可以补充抗体性能的不足, 但是不能完全取代抗体。 一：基因调控方面 Aptamer与配基结合后的变构效应拓展了催化性核酶的研究，使得 可调控的核酶成为可能原核生物中发现的riboswitch （核糖体开关） 更是aptamer参与基因表达调控的一大里程碑，该发现提示不需要 蛋白质因子的参与，RNA与代谢产物结合即可调控自身的转录和翻 译．根据这一原理，人工构建的riboswitch能够实现目的基因的可 调控表达．利用riboswitch特性有可能发展出新型抗生素。