没食子酸对二甲基亚硝铵致小鼠急性肝损伤保护作用及机制研究.pdfVIP

没食子酸对二甲基亚硝铵致小鼠急性肝损伤的 保护作用及其机制研究 硕士生姓名： 马步年 指导教师： 姚继红教授 指导小组： 姚继红 教授 吕莉 副教授 专业名称： 药理学 iF 摘 需 目的：研究没食子酸(Gallic 谢二相酶的诱导作用。 方法： 将50只健康雄性昆明种小鼠随机分为5组：(A)正常对照 组；(B)没食子酸正常给药组(1OOmg／kg)；(C)二甲基亚硝铵肝损伤组； (100mg／kg)。各组小鼠均连续灌胃三天，一天两次，最后一次灌胃结束 后12h，腹腔注射DMN 25mg／kg。24h后摘除小鼠眼球采集血液，并留 取肝脏标本。按照试剂盒说明书采用分光光度法分别测定血清中谷丙转 氨酶(AlanineAminotransferase，ALT)、谷草转氨酶(Aspartate (Superoxide s．transferase， (Reduced 形态学变化，评定各组动物的病理损伤程度。采用免疫组织化学法、 免疫印迹法检测肝脏胞浆内血红素氧合酶．1(Heme Oxygenase．1， s．transferase HO．1)、谷胱甘肽巯基转移酶(GlutathioneAlpha3，GSTA3) factor 2)的蛋白表达。 及胞核内转录因子Nrf2(NF．E2一related 结果： 1．DMN 25mg／kg腹腔注射24h后可出现急性肝损伤，具体表现在： (1)血清中转氨酶AST、ALT活性显著升高(P0．0l，PO．01)。(2)组织损伤 程度明显，镜下观察可见肝窦扩张，伴有大规模出血性坏死及炎症细胞 抗氧化能力下降：MDA水平上升(PO．0 明DMN可导致脂质过氧化及谷胱甘肽耗竭。 2．GA预处理可对DMN引起的肝损伤产生保护作用，并呈现剂量依 赖性，与损伤组相比：(1)血清中转氨酶AST、ALT活性显著下降(P0．0l， P0．01)。(2)组织损伤程度减轻，镜下观察可见出血减少，炎症细胞浸润 较轻。(3)肝脏抗氧化能力升高，脂质过氧化程度降低，表现为SOD、 3．GA对正常小鼠无毒性反应，表现在肝功水平无显著性差异，组 织形态正常，脂质过氧化反应未发生。而且GA可显著提高小鼠的抗氧 化能力，与正常对照组相比，GA正常给药组SOD、GSH．px活性增强 4．蛋白表达情况：(1)与正常对照组相比，损伤组肝细胞核内Nrf2 表达增加，胞浆中HO．1、GSTA3表达增加，表明DMN经肝脏代谢可产 生大量活性氧，促进了Nrf2的核易位，进而上调了HO．1、GSTA3在胞 浆中的表达，体现出机体在针对氧化应激反应时存在自我保护机制。(2) 加，为各组表达最高，表明GA可在活性氧基础上进一步促进Nrf2的核 易位和二相酶的表达，增强肝保护作用。(3)与正常对照组相比，正常给 药组(1 时，GA可提升肝脏的解毒能力。 结论： 1．正常情况下短期应用没食子酸可提高肝脏抗氧化能力及二相解 毒能力。 2．DMN具有显著肝毒性，预防性给予没食子酸可缓解DMN引起的 肝损伤，并呈现剂量相关性，其机制可能与促进Nrf2核易位进而上调细 胞代谢二相酶HO．1、GSTA3的表达有关。 关键词：没食子酸肝损伤二相酶Nrf2 2 attenuates Gallicacid