美金胺联合托吡酯对新生鼠缺氧缺血性脑损伤神经保护作用研究.pdfVIP

【摘 要】 背景与目的 缺氧缺血性脑病 (hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)会造成神经细胞坏死和凋 亡，不但严重威胁新生儿的生命，而且会导致一系列神经系统后遗症。脑内能量代谢障碍 而引起脑组织早期坏死和延迟凋亡是HIE重要的病理机制之一。在此过程中，脑细胞供氧 供能发生障碍可以引发一系列病变，包括谷氨酸受体激活，尤其是 N-甲基-D-天冬氨酸受 体(N-methyl-D-aspartate，NMDA)系统的激活，细胞游离钙离子的蓄积以及钙离子介导的 自由基损伤和线粒体功能损伤，最后导致细胞坏死和凋亡。美金胺作为一种新型的非竞争 性 NMDA 受体拮抗剂，具有较好的神经保护作用的同时不会影响正常的神经活动。托吡酯 作为一种AMPA/KA受体拮抗剂, 具有多种的神经保护作用且毒性小。从理论上讲，这两种 神经保护机制相互依赖、有协同作用，因此我们推测美金胺和托吡酯联合用药能有效地减 轻新生鼠的缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain injury, HIBI）。 材料与方法 7日龄SD大鼠192只按Rice方法制备HI模型。新生大鼠分成4组: ①HI组：只注射 生理盐水； ②美金胺组： HI后即刻经腹腔注射美金胺20mg/kg，其后每12小时注射1mg/kg 维持量，共四次。③托吡酯组： HI后即刻经腹腔注射托吡酯40mg/kg，其后每12小时注 射10mg/kg维持量，共四次。④联合用药组HI后即刻经腹腔注射美金胺20mg/kg，其后每 12小时注射1mg/kg维持量，共四次。同时，经腹腔注射托吡酯40mg/kg，其后每12小时 注射10mg/kg维持量，共四次。 HI后48小时进行TUNEL染色凋亡检测及Caspase-3免疫活性检测和阳性细胞计数， 及 HI 后 72 小时进行神经损伤评分以评价其短期效果。HI 后 21 日进行足错误测试，评估其 神经功能。HI后22日采用TTC染色观察病理改变，并对脑损伤按Palmer等的方法进行评 分和测量右脑重量缺失，即右脑半球相对左脑半球重量损失的百分比。用 SPSS15 统计软 件进行分析处理，结果以均数±标准差表示，F单因素方差分析进行组间均数比较，P＜0.05 被认为差异有显著性。 I 结果 1. TUNEL 阳性细胞计数：在海马 CA1 区和皮质下白质区， 联合用药组显著少于对照 组。Caspase-3阳性细胞计数与TUNEL结果一致。 2. 显微神经损伤评分：在皮质、丘脑及海马区，联合用药组神经损伤显著减少。 3. 足错误测试：联合用药组足错误次数显著少于对照组。 4. 脑损伤评分：联合用药组评分显著低于对照组。 5. 右脑重量缺失百分比：联合用药组显著低于对照组。 结论 1. 美金胺与托吡酯联合用药不但减轻了短期神经损伤而且减少了长期脑组织损伤。 2. 美金胺与托吡酯联合用药在海马CA1区和皮质下白质区可显著减轻神经细胞凋亡。 3. 美金胺与托吡酯联合用药不仅显著改善了病理结果，亦显著改善了神经功能表现。 【关键词】神经保护；美金胺；托吡酯；药理；联合疗法；谷氨酸受体；凋亡 II 【Abstract 】 Objective Hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) can cause neuronal death and apoptosis in neonatal brain. It not only endangers neonatal life, but also leads to neurological disabilities. One of the main pathogeneses of HIE is early necrosis and delayed apoptosis of neurons followed by energetic depletion induced by oxygen and glucose deprivation. In this course, overactivation of glutamate receptors, especially N-methyl-D-