重组蛋白Cfr的单克隆抗体制备及其初步应用.pdfVIP

本研究受“十二五国家科技支撑计划一食品安全风险评估关 2BAK01 键技术研究项目(201 BOO)资助。 万方数据 摘要 Cfr蛋白是由c痧基因编码的甲基转移酶，它能与多种药物作用的靶点结合从而 介导五类药物耐药。在不同国家、地区的人源和动物源细菌中均发现了咖基因，其 携带率有逐年增加的趋势，它的出现和流行给临床医学和公共卫生学带来了潜在的危 害，引起了人们的高度关注。目前c痧基因阳性菌的监测方法主要是普通PCR法，但 监测的结果只能表明该细菌是否含有咖基因，而无法确定c∥基因是否表达了Cfr 蛋白，无法进一步为合理用药和风险评估提供依据。因此，从免疫学方面探索建立对 Cfr蛋白的监测方法就显得十分重要。通过制备重组蛋白Cfr的单克隆抗体；再以制 得的单抗为一抗，用Westernblot方法对临床肠球菌进行检测，达到为建立监测驴 基因阳性菌的免疫学方法提供理论依据的目的。 本研究以实验室保存的纯化的重组蛋白Cfr为免疫原，对BALB／c小鼠进行免疫。 乳化后，再皮内分点注射；一个月后对小鼠进行加强免疫，其抗原量、注射体积均不