固定化酶及其在食品和生物领域的研究进展.pdf

综述 生命科学仪器 2009第7卷/10月刊 固定化酶及其在食品和生物领域的研究进展 尹志娜 （西华大学生物工程学院，6 1 0 0 3 9 ） 摘要 固定化酶技术是酶工程的核心，渗透在现代各种工艺之中，成为不可或缺的工具。本文对其发展、优缺点 和固定技术做了介绍，并简述了其在生物和食品方面的一些研究和应用。 关键词 固定化酶，生物技术，食品技术，生物传感器 1 ．前言 降低其不足因素带来的影响。它的优势有：(a) 易于 将固定化酶与底物、产物分开，方便后续的分离和 固定化酶是酶工程的核心，它有利于实现酶的 纯化；(b)酶的稳定性和最适温度提高，最适pH 值改 重复使用及产物与酶的分离，它使酶工程提高到一个 变，对温度和pH 值适应范围增大，对抑制剂和蛋白酶 新水平。由于它显著的优越性，发展飞速。从50 年代 敏感性降低；(c)可以增加产物的收率，提高产物质量； 开始正式研究到现在已经建立了完整和日趋精深的固 (d)可以在较长时间内连续生产；(e)酶反应条件容易控 定化技术。 制；(f)较水溶性酶更适合于多酶反应；(g)酶的使用效率 1. 1 发展 高，使用成本低；(h)适于产业化、连续化、自动化生产。 固定化酶是指通过化学或物理学手段将酶束缚在 与此同时，由于酶的分离、固定化处理等原因， 一定区间内，限制酶分子在此区间内进行活跃的催化 固定化酶也具有一些难以避免的缺点，如下：(a) 在 作用。固定化酶的研究源于80 年前，科学家们发现酶 固定化过程中，酶活力会损失，尤其是胞内酶，预分 被吸附在骨炭粉上仍具有活性的现象，但真正开展大 离过程使酶活力损失较大；(b)生产成本提高，工厂初 量的研究是从20世纪50年代初开始，1953年Grubohofer 期投资大；(c) 只能用于水溶性底物，而且较适合于小 等人将羧肽酶、淀粉酶、胃蛋白酶和345 酶等结合固 分子底物，大分子底物基本无法进行反应；(d)不适宜 定在聚苯乙烯树脂重氮化载体上实现实验室酶的固定 于多酶反应，部分酶还需要辅助因子的协助才可以有 [ 1] 化 。1969 年，日本人千火田一郎成功地把固定化 效反应。 氨基酰化酶反应应用于L，D 一氨基酸的光学拆分上， 2 酶的固定技术 这是国际上固定化酶应用于连续工业化生产的开端了。 1973年千火田一郎等人又采用固定化微生物细胞连续 2.1 传统固定化技术[3] [2] 生产L 一天冬氨酸 。我国固定化酶研究起步相对要 2.1.1吸附法 晚一些，开始于1970 年，首先是中科院微生物所和上 利用各种固体吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表 海生化所同时开始了固定化酶的研究，成果显著应用 面而使酶固定化的方法称为物理吸附法，简称吸附 价值可观。此后，许多单位相继进行了固定化酶和固 法。吸附法包括物理吸附和离子结合法。工艺简便 定化细胞的应用研究。由于借鉴和引进了大量的国外 和条件温和是该方法显著的优点。可供选择的载体涉 先进技术发展非常迅速，并日趋完善。现在固定化酶 及天然或合成的无机与有机高分子材料，有时酶的纯 在食品、制药、化学分析、环境保护等方面的应用越