木豆叶芪类提取物及其合成类似物调节胆固醇代谢和血管的保护作用机制及研究.pdf

木豆叶芪类提取物及其合成类似 物调节胆固醇代谢和血管保护作 用的机制研究 研究生姓名：骆庆峰 导师姓名： 孙兰教授 学科专业： 药理学 入学时间： 2005年8月 所在院所： 基础医学研究所 北京协和医学院研究生院 二零零八年六月 一木豆叶芪类提取物及其合成类似物调节胆固醇代 谢和血管保护作用的机制研究 中文摘要 粥样硬化的诱发因子中，高脂血症是‘个主要的独立危险因素。所以从药用植物 中寻找具有降血脂作用的天然化合物，并研究其作用机理是近年来的研究热点， 具有重大的应用前景和社会效益。在对高脂血脂诱发动脉粥样硬化的研究中发现， 低密度脂蛋白胆固醇(10w cholesterol 子之一。近期的研究表明胆固醇的逆向转运过程(reverse transport，RCD 在改善血脂代谢，防治动脉粥样硬化中的作用越来越重要。RCT过程能够促进外 周组织胆固醇的清除，降低体内胆固醇水平，延缓动脉粥样硬化的发生和发展。 本课题组在既往的研究中发现，豆类植物木豆的叶子提取物能明显降低动物 的体重和血糖水平。木豆叶总提取物中主要包含芪类成分和黄酮类成分，可用于 治疗妇女更年期综合症、防治骨质疏松、降低血糖。但是，关于木豆叶提取物调 节胆固醇代谢的研究目前还没有报道。本课题在国内外首次以木豆叶提取物为干 预药物，观察芪类成分及其合成类似物S03、黄酮类成分调节体内胆固醇代谢，促 进I汇T过程的机理，并探讨它们抗动脉粥样硬化形成的潜在作用。 1．木豆叶提取物及其合成类似物S03对高脂血症模型动物血脂代谢的影响 首先通过手术去除动物卵巢的方式建立高脂血症模型模拟绝经后女性血脂变 化，初步了解木豆叶总提取物对该模型的治疗作用。研究发现木豆叶总提取物具 有降低动物血脂和血糖水平的趋势。为进一步明确木豆叶总提取物中具有调节胆 固醇代谢作用的有效成分，通过喂食高脂饲料的方式建立高脂血症动物模型，分 别给予木豆叶芪类成分和黄酮类成分，观察两类成分调节血脂的效应和作用机理。 研究结果表明黄酮类成分对于血脂代谢无明显影响。而木豆叶芪类提取物却具有 明显的血脂调节功能，能够减轻动物体重，显著降低高脂模型小鼠血清总胆固醇 活力。同时芪类成分还可以明显减少肝脏中TC和TG的蓄积。为探讨芪类物质的 作用机制，选择肝脏中涉及胆固醇合成、吸收和代谢的三个关键蛋白．HMG．CoAR、 芪类成分可以上调这三者的基因表达，通过促进LDL．C的吸收和增加胆固醇向胆 汁酸转化来降低体内胆固醇水平。． 同时，在实验中还观察到芪类成分的合成类似物S03可以改善去卵巢高脂血 症模型动物的血脂代谢。去卵巢手术后动物体重和血清胆固醇含量异常升高，S03 可以明显减轻去卵巢动物体重和肝脏重量，减少动物血清中Tc含量和LDL．C含 量。此外，S03还可以降低动物体内卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH) 的浓度，纠正去卵巢后的性激素分泌失调。 2．木豆叶芪类单体成分C03对胆固醇逆向转运过程的影响 根据前一个实验结果，选择芪类成分中的单体成分C03作为观察药物，了解 其对RCT过程的影响。巨噬细胞中胆固醇通过ABCAl流出是RCT过程的起始步 骤。同时，由巨噬细胞大量摄取氧化低密度脂蛋白转化成的泡沫细胞，也是动脉 粥样硬化斑块的重要组成部分。肝脏细胞中含有的LDL．R和SR．BI介导了RCT 过程的终止步骤。本实验确定上述在RCT过程起始和终止阶段的重要功能蛋白作 为观察对象，检测C03对胆固醇逆向转运过程中ABCAl、LDL．R和SR．BI蛋白 功能和表达的影响，以及C03抑制巨噬细胞内胆固醇蓄积，减少泡沫细胞形成的 效应。 结果显示C03可以上调巨噬细胞中ABCAl的表达，促进巨噬细胞内【3H】胆固 醇的流出，有助于启动RCT过程。同时还发现C03可以抑制巨噬细胞对氧化低