缺血预处理对在体鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用蛋白质组学及研究.pdf

摘要 目的应用蛋白质组学技术研究缺血预处理对在体鼠肺缺血再灌 注性肺损伤的保护机制，通过比较预处理组和对照组肺组织总蛋白表 达的差异，筛选与缺血预处理保护作用相关的蛋白质。 方法研究选取30只sD大鼠，随机分为假手术组、预处理组和对 照组，每组10只。实验组和预处理组大鼠常规开胸后建立左上肺缺血 再灌注模型，均经历了缺血再灌注损伤，但预处理组在缺血再灌注前 给予缺血预处理干预，两组肺组织随机配对后应用二维凝胶电泳技术 分离出总蛋白质，经考马斯亮蓝显色后应用PDQuest软件进行图像分 质数据库鉴定蛋白质，并利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能 进行归类及总结。假手术组大鼠未予特殊处理。最后免疫印迹法比较 热休克蛋白27在三组肺组织中的表达差异。 结果 1、本研究建立了分辨率较高、重复性较好的在体鼠肺缺血再灌注 损伤的二维凝胶电泳参考图，每张图上平均有517±18个蛋白质点。 2、比较预处理组和对照组肺组织的二维电泳图，45个蛋白质的表 达存在明显差异，进行质谱分析及数据库检索后30个蛋白质斑点得到 了鉴定。另外3种蛋白质存在翻译后修饰现象，提示与缺血预处理的 信号传导有关。 3、本研究发现缺血预处理上调了巯基特异性抗氧化剂、热休克蛋 白27和热休克蛋白73等一些重要蛋白质。 结论 1、蛋白质组学是研究缺血预处理对在体鼠肺缺血再灌注性肺损 伤保护机制的很有前途的工具； 2、本研究鉴定出部分与缺血预处理保护作用相关的蛋白质； 3、本研究发现，缺血预处理通过提高内源性抗自由基酶类活性 和上调热休克蛋白家族来发挥着对肺脏的保护作用。 关键词蛋白质组学，缺血预处理，肺保护，缺血再灌注损伤 ABSTRACT To the mechanismofischemic objectiveexploreprotective On ofrat invivo ischemia—reperfusioninjury by preconditioning lung andto involvedin theischemic proteomics identifyproteins the total preconditioningprecessionbycomparingdifferently expressed in withcontrol proteinexperimentgroup group． Methods30SDratsinvolvedoar were experimentrandomly into dividedsham operationgroup(groupS)，ischemicpreconditioning control animalswereineach group(groupI)and group(groupC)．10 theratsin C and I sufferedfrom group．All group group butthosein I underwentischemic inju