温润通络方对糖尿病模型大鼠周围神经的保护作用实验及研究.pdf

中文摘要 温润通络方对糖尿病模型大鼠周围神经保护作用 的实验研究 摘 要 目的：通过观察模型大鼠坐骨神经及其周围组织中血管 神经生长因子(NGF)的表达，和温润通络方对其影响，探 讨糖尿病周围神经病变(DPN)的发生机理和温润通络方对 周围神经的保护作用，为温润通络方的临床应用提供依据。 丰富和发展中医病因病机学和治疗学理论。 自由饮水进食，饲养于普通动物实验室内。动物适应性喂养 注射1％链脲佐菌素柠檬酸钠．柠檬酸缓冲液(柠檬酸钠．柠檬 血测定血糖值，凡血糖值大于16．7mmol／L者纳入实验。将 造模成功大鼠随机分为5组：模型对照组(简称模型组)、 温润通络方高剂量组(简称高剂量组)、温润通络方低剂量 组(简称低剂量组)、血府逐瘀对照组(简称血府组)、弥可 保对照组(简称弥可保组)。另设正常组大鼠lO只，腹腔注 射等体积的柠檬酸钠．柠檬酸缓冲液。温润通络方低剂量组大 通络方高剂量组大鼠中药量按349／kg·d(为60k成人临床用 中文摘要 (为60埏成人临床用药的lO倍)，每天上午灌胃1次，每 次用药体积均按lml／1009计算。正常组与模型组每天上午1 次灌服等体积生理盐水。观察记录大鼠的一般情况，包括毛 色、神态、体重、摄食、饮水、尿量、行为活动等。灌胃8 周后，于最后1次给药后禁食12小时断头取血，离心，分 离血清，用葡葡糖氧化酶法测定血糖。剖取坐骨神经及其周 固定，HE染色，光镜下观察坐骨神经组织形态变化。同时 运用免疫组化法观察坐骨神经及其周围肌肉组织中VEGF、 bFGF、NGF的表达情况。 结果： 1一般情况 造模前各组动物反应灵敏，毛发光滑，毛色正常，饮食 正常，行动敏捷。STZ注射造模3天后，开始出现多尿、多 饮、多食症状，并逐渐出现体重减轻、精神萎靡、体毛枯黄、 稀疏，大便不成形，行动迟缓，反应迟钝等症状，整体状态 差。连续给药8周后，正常组大鼠表现为精神状态良好、体 重增加、动作自如、毛色白且光洁、无明显烦躁易惊、体重 增长、摄食、饮水及活动均正常。模型组大鼠表现出饮水量、 尿量、摄食明显增加，“三多一少症状典型，毛色枯黄、蓬 松、烦躁易惊、体重显著减轻。血府逐瘀汤组和弥可保组大 鼠同样表现出饮水量、尿量、摄食明显增加，毛色枯黄、蓬 松、烦躁易惊、体重减轻。温润通络高、低剂量组大鼠多饮、 多食、多尿症状逐渐减轻，体重增加，体毛光洁，大便成形， 自主活动增加。温润通络方高剂量组大鼠多饮、多食、多尿 症状减轻程度，体重增加程度等优于温润通络方低剂量组。 中文摘要 2体重变化 模型组大鼠与正常组相比体重明显下降(P0．01)；温 润通络方高、低剂量组、血府逐瘀汤组和弥可保组大鼠体重 皆有不同程度升高，与模型组大鼠比较皆有显著性差异(均 PO．01)；温润通络方高剂量组体重增加显著，与温润通络 方低剂量组、血府逐瘀汤组和弥可保组比较皆有明显差别 (均PO．01)；温润通络方低剂量组虽有体重增加，但与血 府逐瘀汤组和弥可保组比较均无统计学意义(尸O．05)。 3血糖变化 模型组大鼠血糖与正常组相比具有明显差别(PO．01)； 温润通络方高、低剂量组血糖水平与模型组比较皆有显著差 别(均PO．01)；血府逐瘀汤组和弥可保组与模型组比较皆 无显著差别(均PO．05)：温润通络方高剂量组与温润通络 方低剂量组、血府逐瘀汤组和弥可保组比较皆有显著差别 (均PO．01)；温润通络方低剂量组与血府逐瘀汤组和弥可 保组比较皆有显著差别(均PO．01)。 4坐骨神经组织形态学改变 正常组大鼠坐骨神经表现为有髓神经纤维排列紧密，髓 鞘组织正常，雪旺氏细胞散在髓鞘边缘，髓鞘内轴突清晰可 见。模型组大鼠坐骨神经表现为神经纤维肿胀，鞘细胞减少， 神经外膜毛细血管扩张充血，炎细胞浸润，部分轴突消失。 弥可保组大鼠坐骨神经出现部分神经纤维肿胀，鞘细胞数目 减少，大部分髓鞘溶解。温润通络方低剂量组、血府逐瘀汤 组坐骨神经表现为神经纤维肿胀，轴突消失。温润通络方高 剂量组坐骨神经表现为神经中可见到少数正常髓鞘，鞘细胞 数目增多，髓鞘中可见正常轴突。