血必净注射液对脓毒症大鼠肺肾的保护及其作用机制.pdf

中文摘要 血必净注射液对脓毒症大鼠肺肾的保护及其作用机 制 摘 要 目的：脓毒症(sepsis)是感染引起的全身炎症反应综合症 (systemicinflammatoryresponse 明，脓毒症及其并发的多脏器功能障碍综合征(multipleorgan dysfunction 强的缩血管物质。病理状态时，ET．1达高浓度，通过内皮素 受体引起明显而持久的缩血管效应，影响组织血液灌注，导 致多器官功能障碍。脓毒症时，内毒素诱导细胞内诱导型一 氧化氮合酶(iNOS)表达，大量释放一氧化氮(NO)，介导组织 损伤。基质金属蛋白酶(Matrix 家族的一种，称为Ⅳ型胶原酶(也称明胶酶B)，能够降解基底 膜成分。MMP．9活性升高能够大量降解细胞外基质，引起组 然抑制物，其中TIMP．1是MMP。9的生理性抑制物。 本研究通过复制大鼠盲肠结扎穿孑L(CLP)模型，探讨血 必净对脓毒症的治疗作用，同时，通过对脓毒症大鼠ET．1、 脏的形态学及超微结构的变化，探讨血必净注射液对组织的 保护作用，为临床防治脓毒症导致的MODS提供新的思路。 中文摘要 and 方法：本研究应用盲肠结扎穿孔法(cecalligation 0)和血必 假手术组(Shamgroup，n=5)、盐水组(NSgroup，n=1 净组(X group，n=15)。经CLP法制作脓毒症模型。假手术组 只开腹，牵拉盲肠但不结扎，术后尾静脉注射生理氯化钠溶 药浓度为5009／1)。术后6h处死动物，分别留取右肺下叶和 右肾，4％多聚甲醛固定，HE染色光镜观察组织形态学改变； 4％戊二醛固定应用透射电镜观察组织超微结构。留取右肺中 叶称湿重，吸干表面水分后，置于85℃烤箱中24小时至恒 重，称干重，计算肺湿干重L匕(W／D)。留取左肺组织和左肾 组织各100mg迅速冻于液氮中，经逆转录聚合酶链反应 mRNA表达水平。 结果： 1 CLP术后一般情况观察：Sham组大鼠麻醉清醒后活动基本 如常，剖腹未见恶臭、腹腔水肿等表现；NS组大鼠术后有 脓毒症表现：动物苏醒延迟，逐渐出现精神萎靡、竖毛、呼 吸困难等表现，剖腹可见浑浊脓血性渗液、肠管水肿、变黑、 肝肾充血水肿；而XBJ组大鼠术后各方面表现较轻。 2脓毒症模型组大鼠肺组织和肾组织的ET．1mRNA、 手术组，TIMP．1mRNA水平与血必净组没有统计学差异。 3脓毒症大鼠肺组织湿干重L匕(W／D)变化：与假手术组相比， 中文摘要 P0．01)；与盐水组相比，血必净组肺组织W／D比显著减少 w (4．74±O．085．15±O．1l，P0．01)。 4肺组织形态学改变：HE染色光镜下Sham组大鼠肺组织结 构完整，肺泡间隔无水肿，肺泡腔清晰；NS组肺泡间隔增 宽、肺间质充血水肿，肺泡腔可见大量中性粒细胞浸润等； XBJ组改变明显减轻但较假手术组重。电镜下观察：Sham组 细胞绒毛、线粒体、板层小体正常；NS组II型肺泡上皮细 胞线粒体大部分嵴，部分膜融合或消失，粗面内质网轻度扩 张，脱颗粒现象明显，微绒毛数量显著减少，板层小体排空 现象明显；XBJ组形态学及超微结构改变与盐水组相比均明 显减轻。 5肾组织形态学变化：Sham组肾小球、肾小管结构基本正 常；NS组肾小球皱缩明显，肾小管上皮细胞变性，肾小管 囊腔扩张，管型形成，肾间质大量炎性细胞浸润；XBJ组肾 小球、肾小管变化较盐水组减轻。 肾组织超微结构变化：Sham组结构基本正常；NS组肾小球 基底膜部分增厚呈驼峰状，部分足突细胞融合，部分血管内 皮细胞增生变厚；近曲小管游离面微绒毛数量明显减少，排 列不规则，线粒体部分嵴、少部分膜融合或消失；XBJ组肾 小球及近曲小管超微结构改变均较盐水组轻。 结论： 1本实验采用CLP法成功的复制了脓毒症大鼠动物模型。 MMP．9和TIMP．1与炎症反应和组织损