hsa-miR-125a-3p是RhoA-肌动蛋白途径的负性调节因子.pdfVIP

第22卷第2期 辽东学院学报(自然科学版) V01．22No．2 2015年6月 JournalofEastern Jun．2015 LiaoningUniversity(NaturalScience) 【医药与卫生】 江黎黎，姜瑜 (辽东学院医学院，辽宁丹东118003) mRNA和蛋白水平表达情况，结果显示，两种方式处理 hsa—miR一125a一3p的人肺癌A549细胞中RhoA 的细胞中RhoAmRNA均无明显变化，但RhoA蛋白浓度分别下降和增加；再用包含RhoA3’一未翻译区 (3’一UTR)荧光素酶报告基因与hsa—miR一125a一3p 关键词：miRNA；hsa—miR一125a一3p；肺癌；肿瘤 中图分类号：R730．5文献标志码：A 许多患有恶性肿瘤的患者不是死于原发肿瘤， 非小细胞肺癌中低表达，与肿瘤病理分期和淋巴结 而是次级肿瘤，即众所周知的转移瘤。早在1996 年，Sporn报道90％的癌症患者死于转移病灶的发NA一125a一3p表达下调可导致较高的侵袭率和迁 展…。转移依赖于细胞迁移与侵袭能力的进展旧J。 最近发现miRNA能影响广泛的生物学功能，其中125a一3p与非小细胞肺癌的迁移和侵袭有关的假 包括肿瘤细胞的侵袭和转移∞。5j。 miRNA是短的(20。25个核苷酸)内源性非癌细胞侵袭的作用机制。 蛋白编码单链RNA，在靶mRNA的3’一UTR上的 1材料与方法 种子区域间通过碱基互补配对连接而发挥调节靶基 因的作用，具有转录后调控许多靶基因表达的作 1．1 细胞培养 用。其种子区域包含自5’末端2～8个核苷酸， 本研究中肺癌细胞系(腺癌细胞系A549，购 而靶基因则包括肿瘤抑制基因和致癌基因‘6j。 自中国科学院上海生科院细胞资源中心)用含有 10％新生牛血清DMEM培养液孵育，在37℃， hsa—miRNA一125a一3p是miR一125a家族成 3’一末端。目 u／mL的 员之一，来自前体pre—miR一125a 5％CO：饱和湿度条件下培养并加入100 前有关hsa—miRNA一125a一3p功能的报道很少。青霉素和100 Ixg／mL的链霉素。经3次传代稳定 后，细胞汇合达75％时进行转染。 我们研究小组已经报道hsa—miRNA一125a一3p在 收稿日期：2015—02—12 基金项目：2012年辽东学院博士科研启动基金项目 作者简介i江黎黎(1980一)，女，辽宁丹东人，博士，讲师，研究方向：肺癌细胞增殖与凋亡、侵袭与转移调控机 制。 ·123· 万方数据 辽东学院学报(自然科学版) 第22卷 1．2转染 空载体。荧光素酶检测是用荧光素酶检测试剂盒 所有转染均根据操作说明应用Lipo． 次验证。 fectamine2000(Invitrogen公司，美国)进行的。 1．5 寡核苷酸微RNA混合物(2’一O一甲基寡核苷 RNA