Siltuximab单克隆抗体对卵巢癌中IL-6介导的信号传导通路的影响.pdfVIP

中文摘要 生物学行为有关。药物敏感的乳腺癌细胞中没有K,-6的表达，而多药耐药的乳腺 癌细胞则产生高水平的IL-6，这表明IL-6的自分泌与多药耐药有关。更多的证据 表明，IL-6是一种自分泌和旁分泌生长因子，在前列腺癌细胞株中可能为顺铂细 胞毒性的抑制因子。同样，体外实验表明：对于耐顺铂的肾癌细胞株，顺铂与抗 清中，IL-6以高水平表达，且IL．6的高表达也已经在人类卵巢癌模型中被观察到。 对于卵巢癌来说，尽管IL-6作为一个肿瘤标志物较CAl25缺少敏感性，但其产生 可能与肿瘤的侵袭和预后有关。具体来说，m击水平高的患者比正常或低IL-6水 平的患者生存期缩短。此外，最近的证据表明，调节IL-6信号传导通路的治疗策 略可能直接影响细胞对顺铂和阿霉素的耐药。例如：外源性IL-6的治疗导致肿瘤 细胞对细胞毒性药物(包括阿霉素、VP．16和顺铂)产生耐药并抑制这些药物所诱 导的细胞凋亡。相反，通过反义寡核苷酸来阻断IL-6可使肿瘤细胞对这些药物敏 感。此外，我们及其它实验室的研究也显示，IL-6产物在卵巢癌耐药细胞株中及 在卵巢癌病人的血清和腹水中增加。这些数据强有力的支持这个理论，即：IL．6 是临床上一种有效的、重要的抗凋亡基因和耐药调节因子。 体，可中和IL-6的功能，其作用已在不同类型的人类癌症中得到研究。它也被用 于临床试验中，且被癌症病人所接受。在这项研究中，研究了siltuximab对紫杉醇 耐药的卵巢癌细胞株中IL-6信号传导通路及IL-6介导的基因表达的影响。这项研 究对siltuximab和紫杉醇联合治疗卵巢癌提供了更多的证据。 ‘ 研究目的 l通过研究IL-6在卵巢癌组织中的表达，了解IL-6信号传导通路的表达激活 是否与卵巢癌病人的分期、临床预后及疾病的转归有关； 导通路及其基因表达的影响，探讨IL．6信号传导通路的阻断对卵巢癌细胞生长、 凋亡及其耐药的分子生物学机制； 3通过研究siltuximab单克隆抗体对体内肿瘤生长的影响及与紫杉醇的协同 作用，为临床制定靶向阻断K,-6信号传导通路，治疗卵巢癌的新策略提供生物学 依据。 Ⅱ 中文摘要 材料与方法 l标本来源 选取美国哈佛大学麻省总医院近20年来确诊为卵巢癌的26例患者的癌组织 标本，每例患者的标本均包含原发性、转移性和复发性癌组织。 2细胞株 在这项研究中使用的人卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3均购自美国微生物菌 Culture 种保藏中心(American Type 过程如下：把敏感细胞株培养在含有紫杉醇的培养基中，通过逐步提高紫杉醇的 含量经过8个月的培养而获得。 。 3主要试剂和仪器 隆抗体均购自美国Cell Signaling 购自日本尼康公司，多功能酶标仪购白美国MD公司。 4实验方法 4．1细胞培养 研究使用的人卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3、紫杉醇耐药卵巢癌细胞株 链霉素的RPMI 以确认其多药耐药性。用支原体检测试剂盒定期检测所有细胞，以确保其没有被 支原体污染。 ． III 中文摘要 4．2 免疫组化法检测卵巢癌患者癌组织中IL-6蛋白的表达情况 26例卵巢癌患者的癌组织标本(每例患者均包含原发性、转移性和复发性癌 rain， rnin，100％乙醇浸泡5 的组织切片，在60℃恒温箱中烘烤2h；二甲苯脱蜡15