TGF-β1诱导上皮性卵巢癌细胞发生上皮间质转化及其相关分子机制的研究.pdfVIP

中文摘要 l(inase protein B． P13K／Akt)信号传导途径及其下游分子蛋白水平表达变化，旨在从分子水 平上探讨TGF．B1诱导上皮性卵巢癌细胞发生EMT及侵袭转移的信号转导 机制，对深入认识卵巢癌细胞的恶性生物学行为具有重要意义，可能为预 防和治疗卵巢癌的侵袭转移提供一种新的思路和实验依据。 方法：将人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV-3、人卵巢粘液性囊腺癌 培养基中常规培养，待细胞进入对数生长期后用于实验。 在倒置相差显微镜下定时观察细胞的形态变化。 m1)作用不同时间(24h、48h)，以0ng／mlTGF．p1为对照组。采用四甲 基偶氮唑蓝(MTT)法检测TGF—Bl对细胞增殖的影响。 室上面的细胞，用甲醛固定，结晶紫染色，镜下计数穿膜细胞数，与对照 组相比较，检测细胞侵袭能力的改变。实验分组如下：@Control组：加 LY294002作用 m1)的TGF一131作用于癌细胞@LY294002组：10岬ol／ml 作用30min后加入(1 Ong／m1)的TGF．Dl。 4．Western LY294002作用于癌细胞 TGF．131作用于癌细胞@LY294002组：109mol／L ／ml的TGF一91。 5．应用SPSSl3．0统计软件进行分析。 结果： 中文摘要 1．倒置显微镜下观察SKOV-3、3AO细胞的形态学变化 细胞呈纺锤形，部分细胞伸出伪足，细胞排列较为紊乱，细胞间连接较疏 松。 2．MTT实验检测结果 生长抑制作用不明显，对照组和实验组之间差异无统计学意义(P0．05)。 3．细胞侵袭实验结果 1411 (42士5)、(53士3)、(84士9)、(1 8±3)、(374-5)个／高倍镜 TGF．91(10ng／m1)／LY294002组分别为(1 (54士7)个／高倍镜(×100)。 独作用及两者联合处理组的两种细胞穿过Transwell小室的细胞数均明显 侵袭能力较对照组减弱。 4．蛋白印记检测结果 中文摘要 ±0．001)表达低于TGF．131组，(PO．05)。 表达水平。E—cadherin的表达与此相反。 (0．773 TGF—B1组，(PO．05)。 l ±0．005)和N—cadherin(0．8 1 1)低于TGF．[3 组，(PO．05)。 及LY294002+TGF．131组(0．647 结论： 进EMT的发生，使转录因子Twist蛋白表达上调，间质细胞标志物 获得了间质细胞特性，侵袭转移能力增强。 4 中文摘要 胞发生EMT，增强了肿瘤细胞的侵袭能力。 降低肿瘤细胞的侵袭转移能力。 关键词：上皮性卵巢癌；SKOV-3；3AO；上皮间质转化；转化生长 因子一p1；侵袭转移 英文摘要 The of lInduce to Study Mesenchymal