Bcl-2家族成员在菜菔硫烷抑制人涎腺腺样囊性癌移植瘤中的作用.pdf

删㈣㈥㈣㈣Ⅲ 目 录 Y2582039 中文摘要……………………………………………………………………．．1 英文摘要……………………………………………………………………．3 研究论文Bcl．2家族成员在莱菔硫烷抑制人涎腺腺样囊性癌移植瘤中的 作用 前言………………………………………………………………………………………6日U吾……………………………………………………………………………………………6 材料与方法………………………………………………………………8 结果…………………………………………………………：……………………．………．．13 附图……………………………………………………………………15 附表…………………………………………………………………………………．20 讨论…………………………………………………………………………………………．21 结论………………………………………………………………………………………。25 参考文献………………………………………………………………．．26 综述 Bcl．2蛋白家族与肿瘤细胞凋亡…………………………………．．28 致{射…………………………………………………………………………………………………38 个人简历……………………………………………………………………39 中文摘要 Bcl．2家族成员在莱菔硫烷抑制人涎腺腺样囊性癌移植瘤中 的作用 摘 要 目的：裸鼠是一种全身没有毛发，缺乏胸腺的动物。胸腺具有制造T 细胞的功能。裸鼠缺乏T细胞的原因是由于其一基因的突变，这种突变 基因被称为nu基因，属于隐性遗传基因，只有当nu／nu结合时，才能出 现表现型。T细胞具有免疫的功能，能够辅助机体抑制以及杀伤进入体内 的外源物质。没有胸腺，不能产生T细胞的裸鼠，其免疫力很低，当外 源物质进入体内时，不能够及时的被抑制或者消除。基于裸鼠的这些特征， 其就成为了移植瘤模型的一种理想动物。通常，裸鼠经常被用来研究恶性 肿瘤的治疗。根据裸鼠的这些特征，裸鼠移植瘤模型就成为本次实验研究 Bcl．2家族成员在莱菔硫烷抑制人涎腺腺样囊性癌移植瘤中的作用的理想 ．_模型。 adenoid 涎腺腺样囊性癌(salivarycystic 性程度较高的口腔颌面部肿瘤。其临床特征为转移性强，浸润周围神经生 长等。细胞学特征主要是基底细胞样肿瘤，由上皮细胞和肌上皮细胞组成 并排列成类管状，类筛网状，和实性巢样等不同的结构。 制涎腺腺样囊性癌ACC．M细胞的增殖并诱导细胞凋亡。SFN诱导涎腺腺 样囊性癌凋亡的过程是由Caspase介导的。另外，在体外莱菔硫烷诱导人 涎腺腺样囊细胞凋亡的过程中，Bcl．2家族成员起到了不可忽视的作用： 莱菔硫烷可以引起促凋亡蛋白因子Bax、Bak的表达增加，而使抗凋亡蛋 白因子Bcl．2和Bcl．xl的表达下降。我们刚刚进行的莱菔硫烷抑制人腺样 囊性癌裸鼠移植瘤的体内实验研究显示，体内环境中，莱菔硫烷可抑制腺 样囊性癌ACC．M裸鼠移植瘤的增殖生长，并能诱导腺样囊性癌ACC．M 在裸鼠移植瘤中发生细胞凋亡。在这个过程中，Bcl．2蛋白家族是否也和 体外实验一样，起到重要作用，国内外尚未见报道。本研究的目的，是利 用人涎腺腺样囊性癌细胞构建的裸鼠移植瘤模型，通过免疫 组织化学方法来验证Bcl．2家族蛋白的表达是否与体外实验中莱菔硫烷诱 中文摘要 导人腺样囊性癌ACC．M细胞凋亡的情况一致。 方法： l细胞培养：复苏冻存的人涎腺腺样囊性癌细胞，在37度，5％C02 的恒温培养箱中进行贴壁培养。当细胞达到一定浓度时，用0．25％的胰酶 进行消化传代，收集并调整细胞密度为2x107／ml的细胞悬液。 2建立移植瘤模型：将预备好的细胞