血小板糖萼蛋白的ELISA方法的建立和血小板活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义.pdf

血小板糖鄂蛋白的ELISA方法的建立与血小板活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义 中文摘要 I 中文摘要 血小板糖鄂蛋白的ELISA方法的建立与血小板活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义 II 血小板糖鄂蛋白的ELISA方法的建立与血小板活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义 中文摘要 血小板糖鄂蛋白的ELISA方法的建立与血小板 活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义 中文摘要 背景 1. 酶联免疫吸附测定法(ELISA方法)是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与 1 酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。操作步骤如下：（）将特 异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体。（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反 应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。（3） 4 加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。（）加底物：夹心式复合 物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。该 法具有特异性强，且操作简便，灵敏度和重复性较好等优点。 2. 脑血栓是缺血性脑血管病中最常见的一种.它是由于供应脑部的动脉内有血栓 形成 造成动脉管腔狭窄或完全闭塞 使其供血区局部脑组织缺血、缺氧、坏死而引, , 起的神经功能障碍。俗称中风，脑血栓形成原因是脑血管内的动脉粥样硬化斑块使得 血管狭窄 表面粗糙不平 而后斑块破裂出血 ，激活体内的血液凝固系统形成血栓，, , 血液凝固过程血小板释放多种因子。急性脑血栓形成的发病涉及三个因素：血管壁结 构完整性破坏，止血、凝血、纤溶系统的失平衡和血流状态的改变，三种因素相互作 用，共同构成血栓形成的基本条件。近些年来，通过对脑血栓形成发病机制的深入研 究，发现很多分子标志物在血栓形成过程中发挥着的重要作用，且也能够反映上述三 种因素在血栓形血栓前状态．并对血栓形成后不同阶段的干预提供依据。 目的 1.建立血小板糖鄂蛋白ELISA方法，并且用于临床检测。 2.SGC，P选择素，GP1bɑ对脑梗死患者筛选和诊断的意义。 III 中文摘要 血小板糖鄂蛋白的ELISA方法的建立与血小板活化因子对脑梗死患者筛选诊断的意义 方法 1．选用2株互不干扰的单克隆抗体，建立双抗夹心，及选用抗体AN51做包被 SZ-2 biotin SZ-2 AN51 96 抗体，选 做标记抗体 ，用 标记 。 包被在 板孔上，再加入 脑梗死患者样本（含GC）与固相载体反应，然后再加入另一种biotin标记的抗体SZ-2， 35 O 最后再与底物氧化还原反应而成颜色，测其 例脑梗死患者 值。 2.用SZ-2抗体抗GP1bɑ再用流式检测35个脑血栓患者的GP1bɑ表达和用SZ-51 抗体抗P选择素再用流式检测25个脑梗塞患者P选择素的表达。 结果 1.SGcELISA 0.15 5.25ug ml, 50ug l 测量范围 － ／ 灵敏度： ／，精密度：批内低、 8.25 7.35 3.99 (n