大肠菌群特异性检测荧光底物MUGal的合成及应用.pdfVIP

现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2014，Vo1．30，No．8 大肠菌群特异性检测荧光底物MUGaI的合成及应用 马延霞 ’～，吴清平 ，张菊梅 ，郭伟鹏 ，韦献虎 (1．中国科学院广州化学研究所，广东广州 510650)(2．广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重 点实验室，广东省菌种保藏与应用重点实验室，广东省微生物应用新技术公共实验室，广东广州 510070) (3．中国科学院大学，北京 100049) 摘要：4-甲基伞形酮基．B．D．吡喃半乳糖苷 (MUGa1)是食品安全中重要指示菌大肠菌群的特异性快速检测荧光底物。本文采用 相转移催化方法使 4．甲基伞形酮 (4．MU)和四乙酰基廿D．吡喃溴代半乳糖缩合生成保护的糖苷，再在碳酸钠的 甲醇溶液中去保 护生成 4．甲基伞形酮基．D．D．吡喃半乳糖苷 通过对温度、时间和催化剂用量对糖苷化一步产率的研究发现，当温度为 30℃，反应 时间为 16h时，产率最高可达 73．12％。醇解反应一步以碳酸钠为碱产率可达91．01％。在对产物进行 1R和 HNMR结构表征后，进 一 步将产物应用于大肠菌群显色培养基，并和进口底物比较，其产荧光管数经X2检验无显著性差异 (P0．05)，在实际样品检测中， 采用GB4789．3-2010(48h)和MUGal方法 (24h)的阳性检出率均为80％，MUGal方法的检出时间明显缩短。因此，本研究制备 的荧光底物能和进口产品相媲美，可以作为进口底物的替代品 关键词：4．甲基伞形酮．B．D．吡喃半乳糖苷；相转移催化；大肠茵群；月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤 (LST) 文章篇号：1673．9078(2014)8—251．257 SynthesisandApplicationofMUGalwhichistheSpecificFluorescent Substratef0rDetectionofC0lif0rm MAYan-xia’v，WUQing-ping2，ZHANGJu．mei2，GUOWei-peng2，、ⅣElXian．hu二 (1．GuangzhouInstituteofChemistry,ChineseAcademyofSciences，Guangzhou510650，China)(2．GuangdongInstitute ofMicrobiology,StateKeyLaboratoryofAppliedMicrobiology,SouthChina(TheMinistry-ProvinceJointly Development)，GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMicrobialCultureCollectionandApplication，Guangdong OpenLaboratoryofAppliedMicrobiology,Guangzhou510070，China)(3．UniversityofChineseAcademyofSciences， Beijing100049，China1 Abstract：4-MethylumbeUiferyl-6-D—galactopyranoside(MUGa1)isspecificfluorescentsubstmteforrapiddetectionofcoliformbacteria whicharetheimportantindicatorbacteriaofrfoodsafety．Protectedglycosidewasproducedfrom condensationof4-mehtylumbelliferone (4-MU)andtetraacetyl-a-D—galactopymnosylbromideunderhteconditionsofphasetransfercatalysis，andhtendeprotectioninH20C／H3OH solutionofsodiumcarbonategave4-methylmu belliferyl-D-D—galactopyranos