柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对..pdfVIP

第 36卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究报告 第 3期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2008年 3月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 3 11～3 15 柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度 向 瑾 　余 勤 　梁茂植 　秦永平 　南 峰 (四川大学华西医院 GCP 中心临床药理研究室 ,成都 61004 1) 摘 　要 　建立了柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度的方法 。以对溴苯甲酸为内标 ,样品 ( ) ( ) ( 经醋酸钠缓冲液酸化后 ,用 V 正己烷 ∶V 异丙醇 = 95 ∶5 萃取 。以 Ch iralcel OJ H 柱 D aicel Chem icals, μ ) ( μ ) 250 mm ×4. 6 mm , 5 m 为分析柱 , U ltim ateTM SiO 柱 50 mm ×4. 6 mm , 5 m 为预处理柱 ; 流动相为 ( ) ( ) ( ) ( ) ( V 正己烷 V∶异丙醇 V∶三氟醋酸 = 96. 5 3∶. 5 0∶. 1,流速为 0. 5 mL /m in;预处理流动相为 V 正己烷 V∶异 丙醇 ) = 99. 5 ∶1,流速为 1 mL /m in;柱切换时间为 1. 70 ～4. 09 m in;紫外检测波长为 230 nm 。布洛芬消旋体和 ( ) S + 布洛芬标准曲线线性范围分别为 0. 2 1～20 m g/L 和 0. 10 ～10 m g/L ; 日内 R SD 小于 6. 5% , 日间 R SD 小于 6. 1% ;方法回收率为 93. 3% ～107. 1% ,萃取回收率为 80. 0% ～86. 6% 。本法简便 、准确 ,重现性好 ,可 用于布洛芬对映体人体药代动力学研究 。 关键词 　布洛芬 ,手性 ,血浆浓度 ,柱切换 ,高效液相色谱法 1　引　言 当药物分子结构中与碳原子相连接的 4 个原子或基团互不相同时 ,该药物称为手性药物 。建立快 速 、准确 、灵敏的对映体拆分方法为评价手性药物各对映体的生物活性提供了关键的技术手段 。在生物 样品中 ,手性药物及其代谢物的含量极微 ,且易受到大量 内源性成分的干扰 ,分离测定难度较大 [ 1, 2 ] 。 ( ) 布洛芬 ibup rofen , IBU 是一类应用广泛的非甾体解热镇痛药 ,其左右旋体在体内的药理活性及代谢过 程存在显著的差异 [ 3～6 ] 。体外实验表明其右旋体的药理作用是左旋体的 160倍 ,但在体内仅为 1. 4 倍 , ( ) ( ) 主要原因是在体内无活性的 R - 布洛芬转化为活性的 S + 布洛芬 , 因此布洛芬对映体的拆分测定