魏氏拟尾柱虫休眠包囊细胞器的电镜酶细胞化学研究.pdfVIP

维普资讯 f?f一 ； 动 物 学 研 究 2000，Jim．7,1(3)：199--203 CN53 ‘‘lo4o~ ISSN0254 ‘5‘853 ZoologicalResearch 魏氏拟尾柱虫休眠包囊细胞器的电镜酶细胞化学研究 々卯．Ill 陈 灵① 倪 兵 顾福康 葛而范大 至 海 200062) 摘要：为研究纤毛虫在休眠状态下细胞生命活动的特征及细胞器的功能，应用电镜酶细胞化学方法显示． 魏 氏拟尾柱虫 (Paraurest2~ ztx~issei)休眠包囊中，在 自噬泡位置，酸性磷酸酶反应颗粒形成多种形态的泡状 体，ATP酶反应颗粒聚集形成泡状体或球状体，在分散分布的线粒体中于内膜位置形成少数琥珀酸脱氢酶反应 颗粒。由所得结果推测，纤毛虫体眠包囊中的自噬泡消化现象是细胞在特殊生理条件下的重要生命恬动，是休 眠细胞中物质利用和能量获得的主要途径；自噬泡消化中也进行着对能量的利用过程；分散分布的线粒体是功 能细胞器，它们与提供细胞生命活动能量有关： 关键词：端医垫星娃皇；篮堡壁 ；电鱼醒塑照丝堂．捆舵鏊 中国分类号：Q959．116 文献标识码：A 文章编号 ：0254—5853(2000)03—0199—05 1 材料和方法 在纤毛虫包囊现象的研究中，过去的工作大多 集 中在纤毛虫形成包囊过程的形态学观察，并将其 1．1 材 料 包囊的形态分类应用于这类原生动物的系统学方面 所用材料为 1997年秋季在上海动物园小湖内 (顾 福 康等，1992；Raw~nson等，1986；Reid等， 采集，经分离和建立纯系培养的魏氏拟尾柱虫 1983)。Delgado等 (1987)将透射 电镜技术与酶细胞 1．2 方 法 化学方法相结合，揭示 了魏 氏拟尾柱虫 ( m “一 将魏 氏拟尾柱虫接种在直径 6cm左右的培养 rostylaz~eissei)形成包囊时细胞器分泌物与壁结构 皿中，在 2()℃左右温度下用麦粒液孵化的细菌为 起源的关系，但对休眠包囊中细胞器的功能问题未 食料 ，获得无性分裂生殖的纤毛虫。将纤毛虫培养 见进一步的报道。作者 曾对几种腹毛 目纤毛虫包囊 至约布满培养皿底部时，转到恒温箱 内于 10℃左 细胞作了超微结构研究．观察到与细胞生命活动相 右继续培养，约 1d后纤毛虫便形成包囊 ，取形成 关的细胞器结构的变化，并推测了休眠细胞中细胞 10d左右的纤毛虫休眠包囊，按电镜酶细胞化学方 结构与功能两者的关系 (Gu等，1995；顾福康等， 法制备透射电镜标本，观察、照相。3种电镜酶细 1995，1997)。最近作者应用透射电镜技术观察了魏 胞化学方法的主要步骤如下 ： 氏拟尾柱虫休眠细胞中包囊壁、线粒体、自噬泡和 1．2．1 酸性磷酸酶 包囊用 1．5％戊二醛二 甲砷 细胞内膜系统的结构，并假设了其中细胞器结构的 酸钠缓 冲固定液 (pH7．2)于 4C下 固定 2h；0．1 可能功能 (顾福康等，1999)。在此基础上，又应 otol／L二甲砷酸钠缓冲液 (pH7．2)漂洗 4次，每次 用电镜酶细胞化学方法显示了魏 氏拟尾柱虫休眠细 10min；Trls一马来酸缓冲液 (pH5．0)漂洗 2次，每 胞中几种细胞器的生物学活性，以进一步探索纤毛 次5min；室温下以酸性磷酸酶孵育液 [0．2mol／L 虫休眠包囊中细胞器的功能及其休眠细胞的生命活 T s一马来酸缓冲液 (pH5．0)2mE；B一甘油磷酸钠 动特征 现将结果报道如下。 24．5mg；0．02mol