阿维链霉菌中聚酮合酶基因遗传改造.pdf

摘要 阿维链霉菌(Streptomyces 广谱的杀虫抗生素，在医药、农业和畜牧业生产中具有良好的应用价值和广阔的市场前景。 阿维链霉菌发酵产生阿维菌素的同时，还产生另外一种聚酮化合物一寡霉素(oligomycin)， 寡霉紊对哺乳动物有很高的毒性。本研究以产阿维菌素B和寡霉素的阿维链霉菌CZ8．73为出发 菌株，构建了基因缺失载体pXL05，并将其转入CZ8．73中，通过缺失载体和染色体之间的同源 产生寡霉素而仅产阿维菌素B组分，阿维菌素的总产量和B1的产量与出发菌株相当，说明寡霉 素PKS基因簇的缺失并不影响阿维菌素的生物合成。该缺失突变是在染色体上通过同源双交换完 成的．不会发生进一步的重组，因此突变株性状稳定，在工业生产上具有应用价值。 阿维菌素的天然发酵产物共有八个组分，其中只有B1组分的杀虫活性最高，被作为杀虫剂 在农业和畜牧业中使用。生产上需采用有机溶剂萃取和直接结品法以获得阿维菌素B1。目前国 内外尚未见有关仅产阿维菌素B1菌株的报道。根据阿维菌素PKS基因结构与其聚酮合成反应步 骤之间的线性关系，推测B2组分的产生可能是由于阿维菌素PKS模块2中脱水酶(DH)的不 完全活性所造成。我们以不产寡霉素而仅产阿维菌素B的工程菌01m73．12为出发菌株，用