不同溶剂对壳聚糖稳定性及其生物学性能的影响.pdf

谨以此文献给我的导师和我的朋友 苏婧 不同溶剂对壳聚糖稳定性及生物学性能的影响 摘 要 壳聚糖作为一种有良好生物相容性及生物可降解性的天然生物多糖 ，不仅 免疫抗原性小、无毒性，而且具有平衡体内胆固醇 、抗癌、凝血等作用，是一 种良好的保健品和生物医用材料。但是壳聚糖分子内和分子间存在较强的氢键， 只能溶于几种特定的酸性溶剂，如稀醋酸、稀盐酸等。 离子液是近几年新发现的一种新型绿色溶剂，并有研究表明其对壳聚糖有较 好的溶解性。本论文用三种不同的溶剂（传统的壳聚糖溶剂醋酸溶液、由HCl 和甘氨酸制备的GlyCl 溶液以及离子液EmimAc ）溶解壳聚糖，并用NaOH 溶液 和乙醇使壳聚糖从溶剂中析出。对三种不同溶剂溶解后析出的壳聚糖进行了分子 量、脱乙酰度的测定以及傅里叶红外光谱、X 射线晶体衍射检测，比较由不同溶 剂溶解壳聚糖后壳聚糖化学结构的改变，结果表明，再析出的壳聚糖分子量都有 了一定程度的降低，但是三者之间无明显差异，而在晶体结构方面，由离子液溶 解后析出的壳聚糖晶体结构改变比较明显。 对再生壳聚糖进行对大肠杆菌的抑菌性实验，再生壳聚糖抑菌性比原壳聚糖 强，且用离子液（EmimAc ）溶解后析出的壳聚糖抑菌性强于由醋酸溶液和GlyCl 溶液溶解后析出的壳聚糖，因为壳聚糖在中性环境中对革兰氏阴性菌的抑菌性主 要在于氨基的作用，进一步说明壳聚糖在溶解和再析出过程中晶体结构发生了改 变，暴露在外的氨基数量增多。 利用红细胞溶血实验、内毒素实验、细胞毒性实验检测了再生壳聚糖生物性 能。再生后壳聚糖的溶血率均低于1.5%，均远低于生物材料国家标准(5%)，并 且较之原来的壳聚糖也有一定的下降。对壳聚糖进行内毒素含量的测定，一般在 体外实验中内毒素含量测定实验往往被忽略，本论文对再生后壳聚糖以及原壳聚 糖内毒素含量进行了检测，结果表明再析出壳聚糖内毒素含量远远低于原壳聚 糖。对再生壳聚糖与原壳聚糖进行MTT 实验，细胞增值率均在75% 以上，说明 所有材料细胞毒性均在较低水平。对离子液单独进行了细胞毒性测试，结果显示， 离子液作为绿色溶剂，在浓度很低（0.1mg/mL ）的情况下有良好的生物相容性。 壳聚糖在工业上也有较为广泛的应用，在工业生产中壳聚糖溶液需要在短期 内储存并保持其稳定性。而壳聚糖在酸性溶液中容易发生降解，不利于工业上对 壳聚糖溶液的储存，在醋酸溶液中加入甘氨酸作为缓冲，在前12 个小时内，壳 聚糖溶液相对保持稳定，没有发生明显降解，12 小时之后发生明显降解，在醋 酸溶液中加入醋酸钠配制成不同pH 的醋酸缓冲液，壳聚糖在几种不同pH 的醋 酸-醋酸钠溶液中的稳定性较好，短时间内没有发生降解，因此醋酸-醋酸钠缓冲 液利于壳聚糖溶液在工业中的储存。 关键词：壳聚糖、离子液、再生壳聚糖、生物性能、降解 Effects of different solvents on the stability and the biological properties of chitosan Abstract Chitosan, a biocompatible and biodegradable natural biological polysaccharide, not only has less immunogenicity and nontoxicity, but also has functions of balancing cholesterol, anti-cancer and coagulation. It is a good health care product and biomedical material. But there are strong hydrogen bondings between intramolecular and intermolecular of chitosan, thus the chitosan is only soluble in several specific acidic solvents. The ionic liq