25种四川地方晾晒烟遗传关系地SRAP分析.pdfVIP

延伸1min，35个循环；最后720C延伸8min，40C保存。优化后的晾晒烟SRAP 体系重复性好、稳定性强。 2．从30对SRAP引物组合中选出扩增带纹丰富、清晰，且多态性位点百分 比较高的引物组合25对。用此25对引物对27份供试烟草材料进行扩增。根据 数据分析采样原则对扩增条带进行了统计。共检测到3368条扩增带，其中特异 性性条带为998条，平均多态检出率为29．6％。说明SRAP标记技术可有效应用 于地方晾晒烟草种质的分析。 3．根据SRAP数据计算出了烟草种质材料间的遗传相似系数。27份材料的 遗传相似系数为0．26--一0．97，平均为O．62；黄花烟与其它26种普通栽培烟草遗 传差异极其明显，遗传相似系数在0．26一0．51之间：烤烟与其它25份晾晒烟品 种之间的遗传相似系数也较低，在0．66～0．78之间；25份晾晒烟品种之间的遗 传相似系数在O．75--0．97之间，平均为O．86，彼此间遗传相似性较高，而地方晾 晒烟品种间遗传相似有一定差异，但总的遗传基础相对较狭窄。 4．用类平均法(UPGMA)对27份材料遗传相似系数进行聚类分析。聚类分 析表明，当取遗传相似系数为O．74时，可将黄花烟、烤烟和晾晒烟品种明显区 分开，反映出类型间的遗传差异；当取遗传相似系数为0．89时，可将25份晾晒 烟材料3个大类和2个独立的个类；四川晾晒烟的两个传统类别毛烟和柳烟，未 被明显地分聚为两类。 5．将SKAP标记出的部分特异性条带进行回收克隆测序，并对部分测序结 果进行了初步的生物信息学分析。从结果上看，回收效果较好，回收片段长度都 高的序列，从而推测其可能的蛋白质功能，只有片段EU430295未能在比对中找 到同源性较高的片段，无法推测出其功能。 关键词：晾晒烟；种质资源；遗传关系；SRAP ABSTRACT Sun-curedtobaccowasnot the materialsof and only importantproduction cigar for cross mixed alsothe resources typetobacco，butimportantgermplasm proceeding of tobacco．Therehada for and Chinese breeding longhistoryplantingcultivating and resourcesinlandracesofsun-cured sun—curedtobaccoabundant germplasm in the ofintroduction、 tobaccoSichuan Province．However,nowadaysworking of was and seedsthatwaslack management propagationkeeping systematic tobacco tO standarddenomination accomplishedby farmers．Besides，duelacking the for wasnamedtobaccofarmersonthebasiso