MANF对Aβ和tau蛋白过度磷酸化诱导神经细胞毒性的抑制作用.pdfVIP

目 录 英 文 缩 略 词 表 1 中文摘要 3 英文摘要 8 1. 前言14 2. 实验材料：16 2.1 菌株、细胞株：16 2.2 质粒：16 2.3 抗体：16 2.4 主要试剂17 2.5 主要仪器与设备17 3. 实验方法18 3.1 主要试剂溶液的配方18 3.2 质粒转化及提取20 3.3 细胞培养和药物干预22 3.4 细胞转染23 3.5 PI 染色24 3.6 细胞免疫荧光24 3.7 MTT 检测25 3.8 免疫印迹25 3.9 TUNEL 法检测细胞凋亡27 3.10 死亡细胞计数27 3.11 凋亡细胞计数……………………………………………...…...27 3.12 统计学处理…………………………………………………28 4 ．实验结果：28 4.1 Aβ诱导神经细胞毒性29 4.2 Aβ诱导 ER 应激和 MANF 表达29 4.3 MANF 对 Aβ神经毒性的抑制作用 32 4.4 MANF 对 Aβ诱导的细胞凋亡的抑制作用 35 4.5 OA 诱导的 tau 蛋白过度磷酸化38 4.6 重组人 MANF 蛋白预处理对 OA 诱导的 tau 蛋白过度磷酸化 的影响和细胞毒的抑制作用 38 4.7 MANF 基因的表达对 OA 诱导的 tau 蛋白过度磷酸化的影响和 细胞毒的抑制作用39 5 ．讨论：40 5.1 MANF 基因对 Aβ诱导神经细胞毒性的抑制作用 41 5.2 MANF 基因对 Aβ诱导神经细胞毒性的抑制作用 42 6 ．结论：43 参考文献44 附录49 致 谢51 综述52 参考文献61 英 文 缩 略 词 表 英文缩写 英文全称 中文全称 AD Alzheimer‘s Disease 阿尔茨海默病 APP Amyloid precursor protein 淀粉样前体蛋白 A β β-amyloid 淀粉样蛋白 A Absorbence 吸光度值 Amp ampicillin 氨苄青霉素 AP ammonium presulfate 过硫酸铵 BSA bovine serum albumin 小牛血清白蛋白 Bip/GRP78 Binding protein 结合蛋白 CHOP/GADD153 C/EBP homologous protein C/EBP 同源蛋白 D day 天 DAB diaminobenzidine 二氨基联苯胺 DAPI 46-diamidino-2-phenylindole 4,6- 二脒基-2- 苯基 吲哚 DMEM Dulbeccos modified Ea