利用双水相系统转化雄甾_1_4_二烯_3_17_二酮的研究.pdfVIP

药 　物 　生 　物 　技 　术 ( ) 169 Pharmaceutical Biotechnology 　2003 ,10 3 :169～173 利用双水相系统转化雄甾1 ,4二烯3 ,17二酮的研究 1 1 2 2 郝雪秦 ,许激扬 ,陈代杰 ,戈 　梅 ( 1. 中国药科大学生物制药学院 ,南京 210009 ;2. 上海来益生物药物研究开发中心 ,上海 201203) ( β ) 摘 　要 　利用混合植物甾醇 45 % 谷甾醇 ,30 %豆甾醇 ,25 %菜油甾醇 作为底物筛选适合菌株 Mycobacteri ( ) um HCCB006 转化生成雄甾1 ,4二烯3 ,17二酮 ADD 的双水相系统 ,并用表面活性剂对系统进行进一步的优 化。经初步研究得到的最佳转化系统为 16 %PEG 20 0004 %Dextran 20 0008 %OP ,从而使得在底物加量为 1 %时 ADD 的产量达到2. 858gL 。 关键词 　双水相系统 ;雄甾1 ,4二烯3 ,17二酮 ;生物转化 ;表面活性剂 ( ) 中图分类号:Q81 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 2003 　　微生物降解甾醇侧链的工作开始于 20 世纪 60 可能实现连续发酵 ,这将有可能扩大到工业化水 年代 , 已发现有许多微生物能降解甾醇,其中甾体 平[9 ] 。本研究考察了 Mycobacterium HCCB006 在双 的限制性侧链降解产物雄甾1 ,4二烯3 ,17二酮 水相系统中转化生成 ADD 的可行性。 (ADD) 可以作为合成几乎所有甾体药物的前 体[1 ,2 ] 。在甾醇边链微生物降解生成ADD 的过程 1 　材料与方法 中所遇到的最主要的问题是甾醇底物在水溶液培 1. 1 　菌种 ( ) 养基中溶解度差和存在严重的产物 底物 抑制的 实验所用菌种 Mycobacterium HCCB006 来源于 问题。甾醇是一种疏水性化合物,在水中溶解度极 上海来益生物药物研发中心。 低 ,这就导致底物与微生物细胞不能很好的接触 , 1. 2 　试剂 使转化率偏低及转化时间延长。采用超声破碎、表 ( ) ( [4 ] [5 ] 各种分子质量的聚乙二醇 PEG 、葡聚糖 Dext 面活性剂 及有机溶剂 来溶解底物虽然取得了 ran) 、表面活性剂都购于上海