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目 录
摘要…………………………………………………………………………………………………………………………………..I
英文摘要…………………………………………………………………………………………。III
1前言………………………………………………………………………………………………1
1.1仔猪腹泻的流行与危害…………………………………………………………………….1
1.2ETEC与仔猪腹泻……………………………………………………………………………2
1.2.1
ETEC的致病机制………………………………………………………………………2
1.2.2菌毛黏附素……………………………………………………………………………一2
1.2.3肠毒素…………………………………………………………………………………..3
1.3用于防控F4+ETEC引起的仔猪腹泻疫苗研究现状………………………………………4
1.4M细胞靶向性疫苗研究进展………………………………………………………………..6
1.5乳酸杆菌调控肠道健康…………………………………………………….:………………7
1.6乳酸杆菌活载体表达ETEC抗原研究进展………………………………………………..8
1.7研究目的和意义…………………………………………………………………………….9
2材料与方法……………………………………………………………………………………..10
2.1材料………………………………………………………………………………………………………………………10
2.1.1菌种和质粒…………………………………………………………………………….10
2.1.2实验动物………………………………………………………………………………..10
2.1.3引物………………………………………………………………………………………………………………一10
2.1.4主要试剂………………………………………………………………………………11
2.1.5主要实验仪器与设备………………………………………....………………………11
2.2试验方法……………………………………………………………………………………11
大肠杆菌的构建……………………………………………………………………………~11
2.2.2重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定……………………………………………………22
2.2.3重组蛋白免疫学指标的测定…………………………………………………………22
2.2.4重组干酪乳杆菌的构建、诱导表达与鉴定…………………………………………一23
2.2.5重组乳酸菌一次免疫效果评价………………………………………………………25
2.2.6重组乳酸菌三次免疫效果评价………………………………………………………27
2.2.7重组乳酸菌免疫哺乳期小鼠免疫效果评价…………………………………………28
3结果…………………………………………………………………………………………………………………………….30
3.1目的基因FaeG的PCR扩增结果…………………………………………………………30
3.2目的基因FaeG-c01的PCR扩增结果……………………………………………………30
l
3.3目的基因STa-LTB的PCR扩增结果…………………………………………………….3
l
3.4目的基因STb的PCR扩增结果…………………………………………………………..3
1
3.5目的基因STa-LTB.STb的PCR扩增结果……………………………………………….3
东北农业大学农学硕士学位论文
3.6重组表达载体的鉴定………………………………………………………………………32
3.6.1大肠杆菌重组表达载体pET-30b.FaeG的鉴定结果…………………………………32
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