大蒜素长循环脂质体的保护缺血心肌实验及研究.pdf

中文摘费 中文摘要 背景：对缺血心肌的保护研究一一直是心脏学科领域的重点。中药以其副作用 少，多靶点起效独具优势。脂质体是理想的载药体系，把对缺皿心肌有保护 作用的中药与脂质体结合可望产生更好的疗效。 目的：研制大蒜素长循环脂质体，考察其保护缺血心肌的效果，探讨其保护 缺血心肌的机制。 方法： l制剂部分： ①脂质体的制备：用反相蒸发法制备大蒜素长循环脂质体和大蒜素脂质体两 种制剂，用离心法测定脂质体的包封率，用透射电镜观察其形态，用动念激 光散射法测其粒径和粒度分布，并对其稳定性作3个月观察。 ②考察刺激性：大白兔9只，随机分为3组，分别是大蒜素注射液组、大蒜 素脂质体组和大蒜素长循环脂质体组。各组从左侧耳缘静脉、股四头肌注射 或从左侧眼结膜表面滴注上述药物，用同样方法在右侧给予生理盐水作对照， 肉、粘膜的刺激性，并作病理切片。 ⑨测定药物在缺血再灌注大鼠体内的血浆浓度和心肌组织浓度：sD大鼠18只， 随机分为3组，分别是大蒜素注射液组、大蒜素脂质体组和大蒜素长循环脂 质体组。各组均结扎冠脉左前降支30min，复灌3h，造成缺血再灌注模型。 在复灌前15min经静脉注射药物，复灌3h后取血和左室前壁心肌组织，用反 相高效液相色谱法检测血浆和心肌匀浆中大蒜素的浓度。 2药效学部分： ①对心肌梗死范围的影响：sD大鼠48只，随机分为6组，分别是假手术组、 缺血再灌注模型组、倍他洛克组、大蒜素注射液组、大蒜素脂质体组和大蒜 素长循环脂质体组。除假手术组外，其余各组均结扎冠脉庄时降支30min，复 灌3h，造成缺血再灌注模型。在复灌前15min，经静脉注射药物，假手术组 和模型组注荆生理盐水作对照。观察心肌梗死范围(梗死区面积占危险区面积 的百分比)情况。 ②对缺血再灌注心肌形态结构的影响：分别在光学显微镜和电子显微镜下对 缺血心肌的一般病理改变和超微形态结构改变进行观察。 3作用机制部分： ①生化机制：SI)大鼠48只，随机分为6细，分组及给药操作同上。复灌3h 后取血和左窀村壁心肌组织，检测血浆CK、MI)A、SOD、ET及心肌匀浆YlPO、 MDA、SOD含量。 ②心肌微循环：sD大鼠36只，随机分为6组，分组及给药操作同上。用可视 分光组织氧饱和度监测器探测结扎冠脉左前降支前、结扎后10min、25min、 人蒜景K循玮脂质伴保护缺lilt．,D肌的实验删究 复灌后5min、3h共j个时点心肌氧饱和度的变化。 结果： 1制剂部分： ①制蔷的大蒜素长循环脂质体的包封率为84．57％，平均粒径为i03．9nm，电 镜观察呈圆形和椭网形，4／C放置3月无聚集或沉淀：大蒜素脂质体的包封率 1 为87．19％，平均粒径为l4．8nm，电镜观察旱_圆形和椭圆形，常温下放置3 月出现沉淀，4”c放胃3j=j无聚集或沉淀。 ②静脉注射后，火蒜素长循环脂质体、大蒜素脂质体、大蒜素注射液分别使1 只、2H、3只兔耳缘静脉出现充血现象，恢复币常时州分别为10min、lOmin、 60min；肌肉注剩后，均未见明显异常；滴眼后三者刺激反应评分分别为1．3 果示大蒜素注射液对照组兔耳缘静脉充盈，组织问隙水肿，血管壁及周围有 白细胞浸润，而大蒜素长循-q；N质体组及大蒜素脂质体组无明显异常。 ⑧静脉注射3．25h后，大蒜素长循环脂质体组、大蒜素脂质体组、大蒜素注射 液绍的血药浓度分别是2．94、0．09、0．071ag／ml；在心肌组织中的药物浓度 未检出。 2药效学部分： ①缺血再灌注损伤使模型组心肌梗死区面积r与危险区面积的百分比达 中大蒜素长循环脂质体组下降了19．7％口O．01)，药物组之问无显著性差异 (P0．05)： ②光镜观察，缺血．再灌注模型组梗死心肌范围大，毛细I衄管膜结构破坏，心 叽组织间有大量中性粒细胞浸润。大蒜素长循环脂质体组梗死心肌范围明显 缩小，毛细血管膜结构清晰，心肌组织问见少量中性粒细胞浸润；电镜观察， 缺血再灌注模型组缺血心肌细胞线粒体肿胀，嵴减少或消失，排列紊乱，肌 丝断裂，Z线模糊，血管内皮细胞肿胀，突向管腔内，管腔外可见到中性粒细 胞浸润；大蒜素长循环脂质体组缺麻一心肌细胞线粒体排列规则，部分线粒体 轻度肿胀，嵴完整，肌缝结构清晰，Z线清晰，血管内皮细胞无肿胀，管腔外 未见中性粒细胞浸润。 3作用机制部分： ①同缺血再灌注模型细比较，大蒜素长循环脂质体组心肌MPO、MDA水平降低 了1 37．2