grp75表达调控与作用机制——-谷氨酰胺对细胞缺糖损伤的保护作用.pdfVIP

复旦大学博十生学位论立 摘 要 脑缺血、心肌缺血等造成的细胞缺血性损伤是人类许多重大疾病的细胞病理 基础，细胞缺血性损伤包括了细胞缺氧性损伤和细胞缺糖损伤两个基本病理变化。 大鼠的grp75基因于1995年从脑缺血的cDNA文库克隆获得，在心脏、脑、 脾脏、肺等多种组织中有构成性表达。已有的生物信息学资料显示grp75前体带 有一段线粒体蛋白的信号肽。同时国内外的研究显示grp75作为分别定位于胞质 和线粒体内的分子伴侣协助线粒体蛋白质的转运，提高细胞对应激反应的耐受 性。本实验室的前期研究表明当细胞受到缺糖损伤时grp75呈上调表达，而grp75 过表达的细胞对一定强度的缺糖损伤有明显的改善功能。为寻找一种安全性高的 grp75表达增强剂，使grp75对细胞缺糖损伤保护作用通过安全、可操作性强的 手段得以实施，本实验本文以PCI2细胞为模型，检测了一种人体调节必需氨基 酸——谷氨酰胺对细胞内grp75表达的调节作用。用免疫细胞化学法、Western blot印迹法检测细胞中grp75的蛋白含量，结果表明谷氨酰胺可以上调grp75的 表达，特别是对缺糖细胞的上调作用更显著；但这种上调作用与谷氨酰胺的作用 浓度和作用时间并