安徽砀山酥自然的保护区梨种质资源ISSR及研究.pdf

摘要 ISSR(简单重复序列区间)属于一种新的分子标记技术，是根据基因组内普遍存 在的微卫星基序设计单一引物，对基因组DNA进行扩增。扩增的指纹图谱可以同时 提供基因组内多个位点的序列信息，被广泛应用于构建分子遗传图谱、鉴定资源类型、 探讨不同生物型之间的亲缘关系。 目前国内已有不少关于果树植物ISSR研究，有关梨树资源的ISSR研究尚未见 报道。本文采用ISSR技术，对安徽砀山酥梨自然保护区梨种质资源26个生物型进行 研究，对合理利用资源、加快梨育种进程有着重要的意义。 研究主要结果如下： l、从适合植物ISSR分析的45条引物中筛选出了16条适合梨树ISSR分析的引 Z29、Z30、Z32。 2、建立了适合梨基因组DNA的ISSR．PCR反应最佳体系如下：总体积25pI， Buffer2．5 其中10x mmol／L、引物o．5ttmol／L、模板DNA ttL、Taq酶o．5u、M矿2．0 O．20 mmol／L· 40ng、dNTPs 3、利用5条引物扩增的特异带构建了供试的梨不同生物型DNA指纹图谱，可 以区分26个样品中的11个生