输卵管积水患者窗口期子宫内膜glycodelin及其galectiN-3的表达及其意义.pdfVIP

中文摘要 输卵管积水患者窗口期子宫内膜 glycodelin及galectin一3的表达及意义 摘 要 目的：不孕症患者逐年增多，女性不孕患者中约有l／2为输卵管疾患 所致，而输卵管积水所致不孕又占输卵管疾患的10％．30％。IVF．ET技术 可以解决输卵管不通患者的受孕问题。在IVF．ET治疗中发现，与其它原 因所致不孕的妇女相比，输卵管积水妇女胚胎种植率及妊娠率均下降50％， 自然流产率增加2倍【l】。而有研究发现腹腔镜下输卵管切除术或根部离断 后再行IVF-ET治疗，可明显提高妊娠率和活产掣21。目前关于输卵管积 水导致低妊娠率的可能机制有3种：机械冲刷理论、胚胎或配子毒性理论 以及影响子宫内膜容受性理论【3】。近年来子宫内膜容受性已成为生殖领域 subtractive (观察2组)及无输卵管积水组(对照组)窗口期子宫内膜的表达，评价 影响子宫内膜容受性的机制，为可疑输卵管积水患者是否需要在IVF-ET 前行输卵管切除术提供依据。 方法：从子宫内膜容受性相关的差异表达基因文库中筛选出的与子宫 年1月2010年10月在河北医科大学第四医院生殖医学科就诊的女性不 孕患者40例，年龄22．36岁，平均不孕年限3．2a。月经周期规则(25．32 d)，基础内分泌检查正常，无其他内分泌、免疫及代谢性疾病。不孕原因 为输卵管因素、宫颈病变、男性精子异常。25例经欧乃派克输卵管造影 或经腹腔镜检查证实为输卵管积水(观察1组)，其中23例接受腹腔镜输 卵管根部离断术(观察2组)；另15例经欧乃派克输卵管造影证实无输卵 管积水(对照组)。在预计排卵前3-4 d，连续阴道超声监测患者卵泡发育 至18．20 mm并排出，卵泡排出日为排卵第1日，排卵第6．8日为着床窗 中文‘摘要 口期。取观察I组经腹腔镜离断输卵管前及观察2组术后1个月窗口期子 宫内膜及对照组窗口期子宫内膜。所取内膜部分液氮冻存用于mR．NA测 定，部分4％甲醛固定用于免疫组化检测蛋白表达。应用RT-PCR检测技 术，分别取观察l组、观察2组及对照组子宫内膜各约50 mg加入Rezol lml置匀浆器内充分匀浆，提取总RNA，取出0．5山，进行反转录得cDNA， TCAAGATCA 继而进行PCR扩增。glycodelin的上游引物序列为：5-AGT ACTATA CAGCAAGTACCATAG CGG-3’下游引物序列为：5’．GTC G ．3’，扩增片段长度为215 TGATGT bp。galectin．3上游引物序列为：5’．GAA CTTCCA TGGTGAGGTCTATGT C．3’，下游引物序列为：5’．CAC CAAATCGTGCGT 游引物序列为：5，-CGG GAC．3’，下游引物序列为：5-- TGGAAGGTGGACAGCGAG G．3’，扩增片段长度为434 bp。25山的 PCR反应体系包括上、下游引物(10 pmol／I．t1)各1山，cDNA2山，PCR循 环条件为：94℃5rain，1个循环；94℃40s，60℃40s，72℃50s，30个循