诱导型人工骨材料修复兔颅骨缺损实验研究.pdf

摘要 摘要 研究背景 颅骨缺损是神经外科中的一个常见问题，其形成的原因主要见于烧伤、创 伤、肿瘤等。修复骨缺损，重建其生物学特性是神经外科急需解决的重要课题 之一。颅骨缺损的修复主要包括修复材料的选择和修复方式的优化。为了避免 传统的材料所带来的问题，人们开发了许多种人工骨修复材料。其中，“诱导 因子+载体缓释系统”模式已成为骨组织工程学研究的一个热点。一种良好的 诱导型人工骨材料应具有以下特性：①良好的生物相容性及生物降解性；②骨 传导及与其他活性分子复合共同诱导骨发生；③能负载大量细胞，支持骨细胞 生长和分化；④合适的机械强度与可塑形性；⑤原料来源广，生产价格廉，便 于消毒保存。 纵观国内外骨组织工程材料研究可发现，以下几种天然或人工材料逐渐被 大多数研究者认可。例如：骨形态发生蛋白(bonemorphogenetie protein，BMP) 是一种多功能生长因子，其特征是有较强诱导成骨活性，且无种属特异性；胶 释放，可降低BMP的诱导剂量，令其维持较长的作用；羟基磷灰石 纳米级羟基磷灰石(Nano．sized 矿中磷灰石相当，骨修复效果更佳；磷酸钙骨水泥(Calcium Cement， Phosphate CPC)具有可塑型性、吸收性和等温自固化等优良性能。到目前为止，上述各种 材料单独使用或复合应用，均因存在塑形性、孔隙率、机械强度等不同问题而 至实际成骨效果欠佳。 为了找到一种可供临床用来修复骨缺损的组织工程材料，我们经过反复实 (Accessional 自组装构建成纳米级核心载体(Nucleus 系与特性有机地构建成双载体系统(DoubleDelivery System，DDS)；以提取天 然活性蛋白为诱导核心与DDS进行有机组合，在满足材料强度的前提下在DDS Growth 上预制出活性生长通道(Active III 摘要 和bBMP复合物制备成bBMP／ND／AD释放系统，用真空负压技术将释放体系有效 地填充至AGC预制空间，最终制备出在成份、空间构型和生物活性上与正常人 骨极其相似的人造骨主体部分，试图解决现有众多单一载体材料的缺陷。基于 这种认识，我们进行了以下方面的工作：(1)活性蛋白异位诱导成骨评估；(2) 载体材料的物性评估；(3)诱导型人工骨材料修复兔颅骨缺损实验。 一、活性蛋白异位诱导成骨实验 bBMPs)异位诱导成骨性。 方法：取昆明小鼠40只，随机分成2组，将bBMPs材料植入小鼠右大腿 后内侧肌袋内，术后2周、3周、4周、8周分别行放射学检查、组织学方法评 价骨组织生长情况。 结果：术后4周x线片显示材料植入区有小条状密度增高，8周见小块状密 度增高。组织学显示2周有大量细胞集聚；3周有较多的骨细胞，有骨基质生成； 4周有明显骨样组织形成；8周见明显完整的骨组织形成。而对照组没有上述结 果。 结论：本研究提取纯化的bBMPs在小鼠肌袋中具有良好得生物相容性和异 位诱导成骨能力。 二、载体材料的制备与物性评估 观结构、机械强度与可塑性等。 其粒度与微观形态； 功能压力测试机检测其机械强度，XRD钡O其TCP纯度，能谱检测钙磷比，SEM观察 微观结构；@DDS检测方法同上。 品经SEM显示微观结构呈花瓣样，具有HA与胶原的共同特征。 摘要 材料水化14d后，原料成份已全部水化成HA，XRD显示材料中未见有害基团， 孔隙率为45％，能谱分析其成份中钙磷比为1．52；随着水化时间的延长(24h、 72h、7d、14d)，SEM显示该材料的结晶先为针状，最终形成板状，呈低结晶 状态。 0．2505 ND的复合材料压力下降至4200牛顿／cm3左右；动态水化过程XRD测试显 示添加O．25％ND，水化产物未见明显异常；材料的孔隙率为55％，