《PP2A磷酸酶活化剂的晶体结构》.docVIP

PP2A磷酸酶活化剂的晶体结构：特异PP2A肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶PTPA是蛋白质磷酸酶2A（PP2A）必须的和特异性的活化剂，作为一个肽脯异构酶（PPIase）的功能。我们现有的人PTPA的晶体结构和两个酵母同源（Ypa1和Ypa2），揭示了所有A -螺旋蛋白质，跟其他肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶PTPA活动性的分子作用机制，Ypa1与含有脯氨酸的PPIase多肽底物结晶。在复合物中，肽结合在一个肽诱导的二聚体界面，域间沟的保守残基有助于形成肽结合位点和二聚体界面。结构导向突变的研究表明，体内PTPA活动是由肽结合表面的基因突变所影响。这也影响了在体外PP2Ai活化剂和PPIase活动的突变。 简介 PP2A的是蛋白质丝氨酸/苏氨酸主要的磷酸酶之一用来调节细胞内蛋白质磷酸化的水平。这种酶控制，包括代谢，DNA复制不同的活动，转录，RNA剪接，翻译，细胞周期，形态发生，发展和转型。它调节这些过程的能力是通过亚基的定位和翻译后的修饰所管辖的。PP2A的核心成员包括一个36 kDa的全酶催化亚基（PP2AC）和含有HEAmotif含脚手架亚基（PR65 /甲）的一个65KDa的HEAT-motif。这个核心异质二聚体(PR55/B,PR61/B0, and PR72/B00)有着很少的相似性，除了两个A亚基结合域。调节PP2A的机制包括其亚基组成的变化，灭活苏氨酸和酪氨酸及其催化亚基的磷酸化，PR61/B0亚基的磷酸化，和和可逆的甲基化，PP2AC C通过特定甲基LCMT（PP2A的亮氨酸的羧基甲基）和甲基PME-1的催化。 PP2A也被一种先前被认为有着刺激酪氨酸磷酸酶PP2AD活性能力的调节蛋白PTPA调节。然而，最近的研究结果表明，其生理功能更容易激活丝氨酸/ 苏氨酸磷酸酶的PP2A的活性的形式，能与PME-1形成一个稳定的复合物。人的PTPA是由染色体上9q34单个基因所编码。转录产生了七不同的剪接变异体，其中四个是有活性的。基础的基因表达是依赖于无处不在的转录因子Yin Yang 1和拮抗p53的功能。 在芽殖酵母中，PTPA是由两个基因编码，YPA1和YPA2（又名RRD1雷帕霉素和耐删除RRD2）。单个YPA1的缺失比YPA2的单个缺失产生更严重的表型。YPA1的缺失导致一个芽形态异常，异常肌动蛋白分布，生长缺陷，和雷帕霉素抗性。Ypa1和Ypa2缺失赋予雷帕霉素抑制可能通过Tor的间接性调控，是传感信号联级的重要组成部分，控制一个广泛关于养分可用性和生长信号的相关事件。鉴于Ypa1在细胞周期G1阶段的主要作用和在G2/M转录也有调节功能，Ypa2在M片段有作用。两个基因都删除是致死的，虽然这个合成致死是通过‘‘viable’ SSD1（Sit4缺陷的抑制）基因’等位基因（SSD1 - V1导联）抑制的，提出了Ypa1和Ypa2对细胞的完整性有功能。PTPA功能的损失引起带有蛋白的形式的活性酪氨酸磷酸酶样PP2A不稳定合成，作为其评估硝基酚磷酸盐磷酸化去磷酸化的能力。这表明，PTPA可能是用于定义PP2A的基本天然构象。遗传证据确定Ypa1和Ypa2作为PP2A的作用，和PP2A有关的磷酸酶如Sit4，涉及TOR的调节路径。最近的研究表明，Ypa1与PP2A的样磷酸三苯基膦互动，Sit4，和PPG，而Ypa2结合Pph21和Pph22，和PP2A的酵母同源。后者的作用是促进Ypa1。另外，不同的PP2A的样磷酸酶在酵母（Pph21，Pph22，三苯基膦，Sit4，与PPG）可以以被Ypa1或Ypa2激活的不用构象存在。 由PTPA、Ypa1或Ypa2激活的PP2A依赖于ATP或水解ATP.。然而，激酶活性不能被证明的，一致的随着检测激酶序列信号的缺失而缺失。激活机制仍然遥遥无期，直到最近PTPA/Ypa1/Ypa2为肽基脯氨酰顺/反异构酶（PPIase）的鉴定。此外，我们能够在PP2AC提出Pro190作为一个异构化反应的目标。Pro190不仅在物种进化过程中被保留着，而且在PP2A样磷酸酶中其序列也保持不变，说明他的活化机制是非常特别的。除了他们在PP2A活化中的作用，Tap42 - Ypa1 - Sit4和Tap42 - Ypa2PP2AC稳定的三元配合物进行了观察。酵母和哺乳动物中的A4蛋白质，与PP2AC直接干涉独立的PR65 / A亚基，这已被知是在Tor信号通路的重要角色。人类同源的Tap42，a4也被描述为细胞凋亡的抑制剂。Ypa1和Tap42相关的PP2A或PP2A磷酸酶的重要重叠部分被认为是Ypa1缺失株的抗霉素中Tap42 Ypa1的过度抑制剂。然而，Tap42/Ypa /PP2A的复合干扰的TOR信号通路仍是未知。 为了努力去懂得PTPA在分子水平的活性作用机制，我们确定了Ypa1和Ypa2的