利用椭圆偏光谱的dna分子杂交检测方法.pdfVIP

∥4671 88 摘 要 ， ／ (DNA芯片(DNA—chip)，也称为DNA微阵列，是近年来发展起来研究DNA信息 结构的一项新技术。该技术是分子生物学中常用杂交方法的扩展，将大量DNA 49-4+片段以阵列方式固定在载破片、尼龙膜、硅片及金膜等载体上，再通过与标 记的样品进行杂交，检测阵列各点杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的种类 和数量。 杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。目前的检测方法大多需 要对样品进行荧光标记，其中激光扫描共焦扫描设备最为常用。标记物产生的信 号会随时间衰减，因此检测结果和标记水平、检测时间都有很大关系。而且标记 物和激光扫描共焦扫描设备价格昂贵，所以人们也在不断寻找新的检测方法。 作者的主要工作是探索一种样品在不标记的情况下，依靠杂交后DNA分子 自身的改变来进行杂交效率检钡tl的方法。‘』王要内容如下： 1、研究了芯片表面DNA薄膜光学性质及其杂交前后的差异。固定在芯片表 面的单分子层DNA探针薄膜和杂交后的DNA薄膜，在薄膜的质量密度、厚度、光 学性质等方面，会有与样品、探针之间匹配程度相关的改变。 2、在对傅立叶变换红外光谱(FTIR)、拉曼光谱(Raman)、椭圆偏振光谱 (E1li psometry)这几种可能的检测方法 做了初步实验后，发现椭圆偏振光 谱的灵敏度和线性响应能够符合芯片检测的要求，因此选择椭圆偏振光谱作为研 究方法。 3、按照DNA芯片的探针固定方法，在硅基片上制作了单点的单分子层DNA 探针薄膜，和不同序列的样品分别杂交后做了椭匾I偏振光谱测量，分析了椭圆偏 振光谱检测杂交效率的可能性和各参数的响应情况；再和不同浓度的完全匹配样 品分别杂交后做了椭圆偏振光谱测量，分析了样品浓度对杂交效率的影响。 4、最后给出了椭圆偏振光谱用于DNA芯片检测的装置，为将来的设备构建 作了基础的准备工作。 关键词：分子杂交DNA芯片探针样餮光学椭圆偏振光谱 ABS’IRAC’l’ DNA calledDNA anew thathas chip，also microarray,is technologydeveloped toresearchDNAinformationstructureinrecent isachemical years．Hybridization the onwhichentireDNA isbased．Probeswithknown process chipindustry identity is onasolidsurfacesuchas immobilized filmandSOon glass，nylon，silicon，goldby withlabeled check method，then the of array hybridize samples．We intensity ateach can themoleculevarietiesand hybridizationsignal spo