刺五加叶中酮类化合物的提取、分离及抗氧化活性研究.pdfVIP

摘 要 刺五加是一味传统中药，属五加科植物，具有抗疲劳、抗炎、抗菌、抗肿瘤、治阳 痿等功效，含有黄酮、皂苷、多糖、微量元素和氨基酸等化学成分。本文以刺五加叶中 的黄酮类化合物为研究对象，进行提取、分离和抗氧化活性研究。 ⑴将传统的浸提、回流提取方法和现代的超声、ASE 快速溶剂提取方法进行了对比 分析，研究结果表明超声提取法为刺五加叶中黄酮类化合物的最佳提取方法。利用正交 实验优化超声法提取刺五加叶中总黄酮的提取工艺，以 50%乙醇溶液提取，提取时间为 1.5 h，提取次数为2 次，溶媒倍量为 20 倍为最佳提取条件，提取率为 5.192%，加样回 收率达到 99.98% 。 ⑵采用高速逆流色谱技术对刺五加叶中有效化学成分进行分离提取研究，选用乙酸 乙酯：甲醇：水（1:0.15:1，V/V/V）为溶剂系统，检测波长为254 nm，从乙酸乙酯萃取 层中分离得到了芦丁及其同分异构体，绿原酸，槲皮素，金丝桃苷及其同分异构体，其 中绿原酸纯度为 88.29%，槲皮素纯度为 78.59%，芦丁及其同分异构体和金丝桃苷及其 同分异构体分别被同时分出。 采用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术对刺五加叶总黄酮粗提物进行分析，结合 高效液相色谱图中各化合物的保留时间及其相对分子质量，与有关文献进行比较，确定 了刺五加叶粗提物中含有芦丁及其同分异构体，金丝桃苷及其同分异构体，两种二咖啡 酰奎宁酸类化合物，绿原酸，槲皮苷和槲皮素等 9 种化合物。 ⑶分别采用清除 DPPH 自由基和对羟基自由基两种方法对刺五加叶的总黄酮粗提 物进行抗氧化活性研究评价。结果表明，刺五加叶总黄酮粗提物对 DPPH 有良好的清除 作用，随其浓度的增加，随反应时间的延长，清除作用增强，30 min 后趋于平稳，测定 IC50 为 0.0865 mg/mL ；对羟基自由基具有良好的清除作用，随着浓度的增加，清除作用 增强，结果表明清除率与黄酮浓度之间存在着一定的量效关系。 关键字：刺五加叶；黄酮；高速逆流色谱；抗氧化 I Abstract Acanthopanax senticosus (Rupr et Maxim.) Harms is Araliaceae and a traditional Chinese medicine, with anti-fatigue, anti-inflammatory, antibacterial, antitumor, cure impotence and so on. Saponins, flavonoids, polysaccharides, trace elements and amino acids etc have been found in Acanthopanax senticosus (Rupr et Maxim.) Harms . This will be the leaves of Acanthopanax senticosus as the research object extraction, separation and antioxidant research. ⑴The experimental results show that the ultrasonic extraction method is the best extraction technology by compared with the reflux method and accelerated solvent extraction , the optimal technology are as follows: the ethanol concentration is 20 times of 50%, ethanol extraction time 2 times and 1.5 hours each. The extraction rate is 5.192% . The recovery is 99.98%