【创新设计】2016年高三生物（人教版）一轮复习：能力提升案2　与酶相关的实验探究(实验6).docVIP

能力提升案2　与酶相关的实验探究(实验6) 突破点　三法破解酶实验难题　 [知识精讲]探究酶的催化作用、专一性、高效性及影响酶活性的因素，是高考的热点和难点。遵循“对照原则”利用“对比法”进行探究，是解答此类试题最基本的思路和方法；分组编号→施加实验条件→观察实验现象→得出结论，是此类实验最基本的步骤。下面对“破解”酶实验难题的三个方法进行分类分析。 1．用“试剂检测法”鉴定酶的本质 (1)实验原理和方法 (2)设计方案：项目 实验组 对照组 材料 待测酶溶液 已知蛋白液(等量) 试剂 分别加入等量的双缩脲试剂 现象 是否呈现紫色 呈现紫色 结论 呈现紫色说明该酶为蛋白质类，否则该酶不属于蛋白质类 同理，也可利用吡罗红能使RNA呈红色来设计实验验证酶是RNA。 2．用“对比实验法”探究或验证酶的高效性、专一性及影响酶活性的因素 (1)验证酶的高效性 ①设计思路 验证酶高效性的方法是“对比法”，即通过对不同类型催化剂催化底物的反应速率进行比较，得出结论。 ②设计方案 项目 实验组 对照组 材料 等量的同一种底物 试剂 与底物相对应的“酶溶液”(如生物材料研磨液) 等量的“无机催化剂” 现象 反应速率很快，或反应用时短 反应速率缓慢，或反应用时长 结论 酶具有高效性 (2)验证酶的专一性 ①设计思路 验证酶专一性的方法也是“对比法”。常见的有两种方案：底物相同但酶不同或底物不同但酶相同，最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。 ②设计方案项目 方案一 方案二 实验组 对照组 实验组 对照组 材料 底物相同(等量) 与酶相对应的底物 另外一种底物 试剂 与底物相对应的酶溶液 另外一种酶溶液 同一种酶(等量)溶液 现象 发生反应 不发生反应 发生反应 不发生反应 结论 酶具有专一性 酶具有专一性 3.用“梯度法”确定酶的最适温度和pH (1)设计思路 常用“梯度法”来探究酶的最适温度(或pH)，设计实验时需设置一系列不同温度(或pH)的实验组进行相互对照，最后根据实验现象得出结论——酶促反应时间最短的一组所处的温度(或pH)即最适温度(或pH)。相邻组间的差值(即梯度值)越小，测得的最适温度(或pH)就越精确。 (2)实验设计思路。 ①探究酶活性的最适温度 检测反应物的分解速率或反应物的剩余量(或生成物的生成速度或生成量) ②探究过氧化氢酶的最适pH的实验设计思路如下： 实验变量分析 (1)自变量：是指人为改变的变量，如氯化铁和肝脏研磨液，酶促反应温度、pH的变化等。 (2)因变量：是指随着自变量的变化而变化的变量，如H2O2的分解速率或酶活性。 (3)无关变量：是指除自变量外，其他对实验结果能造成影响的可变因素，如H2O2浓度、肝脏研磨液新鲜程度等。　　　 [考题示例] 【示例1】 (2013·江苏改编)为了探究温度、pH对酶活性的影响，下列实验设计合理的是(　　) 实验编号 探究课题 选用材料与试剂 ① 温度对酶活性的影响 过氧化氢溶液、新鲜的肝脏研磨液 ② 温度对酶活性的影响 新制的淀粉酶溶液、可溶性淀粉溶液、碘液 ③ pH对酶活性的影响 新制的蔗糖酶溶液、可溶性淀粉溶液、碘液 ④ pH对酶活性的影响 新制的淀粉酶溶液、可溶性淀粉溶液、斐林试剂 　　　　　　　　　　　　　　　　　　A．实验① B．实验② C．实验③ D．实验④ 解析　本题考查影响酶活性的因素的实验设计，意在考查考生的实验设计与分析能力。过氧化氢受热易分解，不宜用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响，故实验①不合理；蔗糖酶不能催化淀粉水解，故实验③不合理；淀粉在酸性条件下也会发生水解反应，不适合用于探究pH对酶活性的影响，故实验④不合理。 答案　B 【示例2】 (2012·全国大纲卷，33)某同学为了探究pH对人唾液淀粉酶活性的影响，设计了如下实验步骤： ①在A、B、C、D、E 5支试管中分别加入pH 5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的适宜浓度缓冲液5 mL，再分别加入质量分数为1%的淀粉液1 mL。 ②各试管中分别加入适当浓度的唾液稀释液1 mL，摇匀。 ③将5支试管放入70 ℃恒温水浴中，保温时间相同且合适。 ④取出各试管，分别加入斐林试剂2 mL，摇匀。 ⑤观察各试管溶液的颜色，通过颜色深浅判断唾液淀粉酶作用的最适pH。 上述实验步骤中有2处错误，请更正并说明更正的理由(不考虑试剂的浓度和加入量、pH梯度以及实验重复次数)，以便实验能得到正确的预期结果。 (1)_________________________________。 (2)________________________________________ 解析　(1)唾液淀粉酶的最适温度为37 ℃，70 ℃环境中该酶将失活。 (2)斐林试剂与还