亲和色谱法究五种中药活性成分与固定化人血清白蛋白的相互作用.pdfVIP

摘 要 开展中药小分子特别是多组分分子与蛋白质相互作用研究，可望为中药现代化进程 中的中药药理、中药活性成分筛选、药物分子结构改造、科学理解传统中药复方以及药 物配伍等环节提供理论依据和指导。本论文利用亲和色谱，采用前沿色谱和竞争置换实 验方式，研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素、绿原酸、香草酸等五种中药活性成分与固定 化人血清白蛋白(HSA)的相互作用，具体工作如下： 1．采用前沿色谱法测定这五种中药活性成分在固定化HSA柱上的吸附量，应用 结合位点种类数。结果表明，阿魏酸、丹皮酚、绿原酸、香草酸与HSA均只存在一类 结合位点，而葛根素与HSA存在两类结合位点。 2．采用竞争置换法中的自我竞争方式测定了这五种中药活性成分与HSA的结合常 数，发现它们与HSA之间的结合属于弱结合作用。 3．采用竞争置换法中的相互竞争方式研究了阿魏酸、丹皮酚、葛根素三种中药活性 成分之间的相互竞争行为。结果表明，阿魏酸与丹皮酚竞争HSA上的同一类结合位点， 且阿魏酸和丹皮酚共同竞争葛根素与HSA的一类结合位点。对中医理论上常用含有阿 魏酸、丹皮酚、葛根素的中药配伍使用增强彼此疗效的现象进行了解释。利用探针试剂 判断阿魏酸和丹皮酚与HSA作用的具体蛋白结合域为mdole