辅酶nadp)h自发荧光在细胞内的观测.pdfVIP

摘 要 新陈代谢是生命活动的基础，是生命活动最重要的特征。研究活细胞中新陈 代谢的情况对分析细胞活性和生命活动有重要意义，NAD(P)H白发荧光是表征细 胞内新陈代谢的一个指标，可以通过荧光显微镜来探测细胞内NAD(P)H分布和变 化情况。 基于荧光成像和光谱技术的，观测活细胞和活组织内的生物荧光现象，是现 今光生物学研究领域的重要课题。荧光显微镜在生命科学领域的广泛运用，为探 索生物提供了有利地手段。运用奥林巴斯IX2一DSU——转盘式共聚焦显微镜 (Disk Biological Scanning Microscope)可以满足实验中的总体需求。为了 保证实验的顺利进行，分辨率、灵敏度、成像速度、光漂白等因素都应经过慎重 选择和考虑。 近年来也有研究表明在嗜中性粒细胞、巨噬细胞和某些肿瘤细胞中，可以观 测到周期性振荡的存在。从物理学角度考虑，时空的结构存在于许多物理、化学、 生物的状态之中。当一个化学系统远离平衡态时，这个系统就会不稳定，并且自 发地形成一些时间和空间结构，即耗散结构。这种表征新陈代谢的耗散结构存在 一定的普遍性，细胞系(株)之间存在的差别和具体作用机理都是这方面研究的 关注点。 在前人对嗜中性粒细胞的NAD(P)H自发荧光的研究基础上，我们发现在RBL --2H3细胞的细胞质中也能观察到NAD(P)H波的存在，这一点也证实：这样的新 陈代谢结构在细胞中是普遍存在的。同时，我们还发现NAD(P)H波的存在和移动 了形成的基础。当在另外一些细胞中NAD(P)H主要被局限于线粒体中时，表征细 胞新陈代谢的NAD(P)H振荡此时将由细胞质中的存在转换成在线粒体中存在。 外界物理因素对生物体的新陈代谢有重要影响。温度往往是考量生物体对外 界敏感度的一个参数。我们研究发现：RBL一2H3细胞的NAD(P)H自发荧光在不 同温度下的荧光强度会有一定变化。随着温度的升高，处在分裂期的细胞NAD(P)H 荧光强度有大幅度的降低；而处在分裂间期的细胞的NAD(P)H荧光强度没有明显 的变化。这与细胞分裂时新陈代谢的旺盛程度有直接关系。实验表明：处在不同 相比处在分裂间期的细胞对温度变化更为敏感。 关键词：NAD(P)H自发荧光振荡结构RBL--2H3细胞温度敏感性 2 Abstract Nicotinamideadeninedinucleotide an phosphate(NAD(P)H)isimportant involvedinthe metabolismof bindsto coenzyme energy livingcells．NAD(P)H and associatedwimbothaerobicanaerobicmetabolism． proteins The and distributionsof cellular concentrationsare spatialtemporal NAD(P)H as ofthemetabolismin SOfar theoreticallypredictedtypicalpatterns livingcells，and be observedin fast the ofthe autofluorescencecellular only neutrophils．Byimaging withasensitiveCCDdet