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groupintron编码的成熟酶对intron剪接的影响

IIintron编码的成熟酶对intron剪接的影响 Group 摘 要 IIimron是催化RNA,可以通过两步连续的转酯反应从前体mRNA Group IIintron 中自剪接,连接两侧exon,释放出典型的套索状intron。典型的group 二级结构由六个茎环结构域组成(结构域I~VI),其中结构域IV环区包含一个 frame,ORF),编码多功能蛋白质,该蛋白质一般 开放阅读框架(openreading 具有反转录酶、成熟酶和核酸内切酶三种活性。 本论文研究海洋蓝细菌Trichodesmium IIintron编 erythraeum基因组中group IIintron自剪接的作用。Zerythraeum的 码的反转录酶样(RTL)蛋白对group II IIintron 核糖核酸还原酶(RIR)基因中包含3个groupintron,其中第一个group (以下简称intron IIintron(以下简称intron13)都包含一个 11)和第三个group Escherichia 脂糖凝胶电泳分析鉴定PCR产物,DNA检测显示两条带,一条对应于前体RNA, 另一条对应于剪接RNA。首次证明在Ecoli中,RIR基因的intron11编码的RTL 蛋白能够帮助intron11进行自剪接。 coli细胞,诱导表达,提 pAR-RTLm,与表达载体pDR一1D共同转化Escherichia 帮助intron11进行自剪接。 II 另外,将构建含有groupintron的表达载体pDNl-4(Z 聚合酶III IIintron 13亚基基因dnaN包含4个groupdnaN-1,.2,.3,.4,它们都不编 码RTL蛋白质)与pAR.RTL2表达载体共同转化Escherichiacoli细胞,诱导表 不能帮助非同源性的intron进行自剪接。 coli中,RIR基因的intron11是在intron自身编码 实验证明:在Escherichia 的RTL蛋白的辅助下进行自剪接的,而非宿主体内的蛋白质。RTL蛋白能专一 II II 性的帮助编码它的groupintron进行自剪接,而不能帮助非同源性的group intron进行自剪接。 II 关键词:group 进化 EFFECTOFGROUPIIINTRON—ENCODED MATURASEONINTRONS ABSTRACT IIintronsare RNAsandsomememberswerefoundto Group catalytic self-splice fromtheir twoconsecutivetransesterificationreactionsthe pre-RNAs by joining exonsand theintronina

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