RNAi技术抑萝卜过氧化物酶rsprx1基因表达的初步研究.pdf

摘要 过氧化物酶参与植物生长的整个生命过程，包括花青素代谢。在本实验室已研究过 氧化物酶与花青素关系的基础上，为了进一步探讨过氧化物酶对花青素的作用机理，本 实验以“心里美”萝卜过氧化物酶rsprxl基因为目的片段，构建含有rsprxl基因正反义 片段的植物双元表达载体pART-rsprxli，通过农杆菌介导，用注射的方法在萝卜播种后 的第65天进行转染，此后每3天取一次样观察生长期rsprxl基因的抑制情况，并同时 以含有空质粒pART27的农杆菌及清水做对照组，检测相关指标，获得以下主要结果： 1、抗氧化酶类： 性差异(pO．01)，干扰载体对rsprxl基因的最大抑制效果发生在实验后期。 两个对照组，并具有极显著性差异(p0．01)。由此证明在过氧化物酶活性较低的情况下， 植物体内会产生更多的过氧化氢酶来消除过剩的自由基。 著性差异(p0．05)。 达到最低值，且与对照组相比有极显著性差异(p0．01)，rsprxl基因的抑制对其的影响 主要发生在实验后期。 12天达到峰值，且与对照组相比有极显著性差异(p0．01)；高效液相分析结果表明 pART-rsprxli组的花青苷在种类和含量上与对照组相比均有差异。 对照组，与m和MYB75变化趋势相一致。 及花色苷合成水平上影响花青素的积累，对过氧化氢酶活性的升高、可溶性蛋白及H202 含量也有一定的影响。 关键词：rsprxl基因，花青素，RNAi，过氧化物酶 ABSTRACT Peroxidaseisinvolvedin and metabolism．In plantgrowth metabolism，especially,anthocyanin orderto themechanism on construct 1i explore peroxidaseacting anthocyanins，apART-rsprxcontaining the sense and antisense wasconstructedthe partial correspondingsequences by Chineseredradish peroxidasegene strain a T-DNA the rsprxlfragments．Agrobacteriumcarrying expressingihpRNA was intothe radishabout65 after usedfor transgeneinjected were growing days sowed．Samplesanalysis harvested3 after every the andwaterwere days injection，AgrobacteriumcontainingpART-27 usedascontrols．The mainresultswereobtained： following 1．Antioxdase POD：Peroxidaseofradishwaslower in than activity consistentlypART-rsprxligroupcontrols， andatthe